in vivoカルシウムイメージングを用いた客観的疼痛評価方法の確立

利用体内钙成像建立客观疼痛评估方法

基本信息

批准号：
22KJ0196
负责人：
工藤葉子
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は安定して遺伝子組み換え動物を供給できる環境を作ることに重きを置き、外部の施設で繁殖をしてくださっている先生と連携を行った。繁殖中の遺伝子組み換え動物の様子を確認しつつ、遺伝子組み換え動物以外の動物を用いながら、安定した手術手技の確立と、評価方法の確立を目指した。通常の動物でも侵襲を伴う手術であるため、毎回同じような神経損傷モデルを作製することに苦戦している。手術の麻酔方法もまだ吸入麻酔薬でしか行えておらず、静脈麻酔薬を用いての手術方法の実践や、顕微鏡で観察する際に静脈麻酔で維持させる装置の確立も並行して進めている。また、遺伝子組み換え動物でなくても本実験の目的を達成させるために同じ実験系を確立できないか試行錯誤をしており、代替となる蛍光色素などを検討している。脳神経細胞に蛍光カルシム蛋白を発現していない遺伝子組み換え動物を使用する場合には、観察可能な脳の領域も異なるため、本実験の目的を達成するのにふさわしい脳領域の観察が可能かどうか、手術方法も可能かどうかを含めて総合的に検討を行っている。動物実験を行うのにも限りがあるので、動物実験ができない期間には、実際の慢性疼痛患者の大規模コホート研究のデータを使用させていただきながら、実験データの処理方法にも関与する統計学の知識を学んだ。慢性疼痛患者の疫学的特徴や治療方法の実際を学ぶことで代替で観察する脳領域の候補についても理解を深めることができた。動物実験のデータをまとめていく上でも疫学統計の知識と技術は非常に重要であり、今後結果をまとめていく際に学んだ知識と技術を活かしたい。

今年，我们强调创造一个可以稳定地提供转基因动物的环境，并与在外部设施繁殖的老师合作。在繁殖过程中检查转基因动物的状态时，我们旨在建立稳定的手术技术和评估方法，同时使用除遗传改良动物以外的动物。即使是普通动物也是侵入性的，因此它们每次都难以创造类似的神经损伤模型。手术麻醉方法仍然仅与吸入麻醉药一起使用，我们还致力于使用静脉麻醉药实施手术方法，并在显微镜下观察时建立可以在静脉麻醉下维持的设备。此外，即使它不是转基因动物，我们一直在尝试和错误来确定是否可以建立相同的实验系统以实现该实验的目标，并正在考虑替代性荧光染料。当使用不表达脑神经元中荧光钙蛋白的转基因动物时，可观察到的大脑区域也不同，因此正在做出全面的考虑，包括是否有可能观察适合于实现该实验目标的大脑区域，以及是否也可以进行手术方法。由于动物实验数量有限，因此在无法进行动物实验的时期，我们使用了对实际慢性疼痛患者的大规模队列研究中的数据，同时还学习了在处理实验数据中也涉及的统计统计知识。通过了解慢性疼痛患者的流行病学特征和治疗方法，我能够加深对替代性大脑区域的理解。当从动物实验中汇总数据时，流行病学统计学知识和技术非常重要，我们希望利用未来汇编结果时学到的知识和技术。