Development of cancer-specific monoclonal antibodies to the Eph receptor and analysis of their recognition mechanisms

Eph受体癌症特异性单克隆抗体的研制及其识别机制分析

• 批准号: 22KJ0297
• 负责人: 七宮 蓮
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ0297/
• 关键词: EphB4; Eph receptor; CasMab法; がん特異的抗体; モノクローナル抗体; がん; 抗腫瘍; 抗体医薬品

Eph receptor B4 (EphB4)は乳がんや肺がんなどの複数のがんにおいて高発現している膜タンパク質であり、がん細胞の増殖、浸潤、転移、及び血管新生に寄与することが報告されている。しかし、EphB4は静脈内皮細胞を中心とした多くの正常細胞においても発現が認められ、副作用の観点から、がん細胞特異的なEphB4に対するモノクローナル抗体の開発が望まれている。そこで本研究では、がん細胞特異的に膜タンパク質を認識するモノクローナル抗体を作製する手法であるCasMab法を用いて、がん細胞特異的な抗EphB4抗体の開発を目指している。我々は最初に、Cell-Based Immunization and Screening (CBIS)法を用いて、がん細胞に内在的に発現するEphB4を特異的かつ高感度に認識する抗EphB4抗体の作製を目指した。その結果、フローサイトメトリーやウェスタンブロット、免疫組織染色といった、全てのアプリケーションに使用可能である抗EphB4モノクローナル抗体であるB4Mab-7の作製に成功した。また、B4Mab-7以外にも、がん細胞に発現するEphB4を特異的に認識するモノクローナル抗体を多数作製することに成功している。今後は、フローサイトメトリーを用いて正常細胞のEphB4には反応せず、がん細胞のEphB4のみに特異的に反応性を示す抗EphB4モノクローナル抗体のスクリーニングを実施する。さらに、in vitroとin vivoの両方においてがん特異的な抗EphB4抗体による抗腫瘍効果を検討し、そのメカニズムの解明を目指している。

Eph receptor B4 (EphB4) is highly expressed in multiple tissues of the breast, lungs, and lungs, and is associated with cell proliferation, infiltration, migration, and angiogenesis. EphB4 is central to venous endothelial cells, and many of them are found in normal cells. Side effects are identified and cell-specific EphB4 antibodies are expected to develop. In this study, we investigated the application of CasMab method in the production of cell-specific anti-EphB4 antibodies, including the understanding of cell-specific anti-EphB4 antibodies. We initially developed Cell-Based Immunization and Screening (CBIS) methods to identify EphB4-specific, highly sensitive, and anti-EphB4 antibodies. The results showed that anti-EphB4 antibody was successfully produced by immunostaining and immunostaining. EphB4 was successfully detected in cells other than EphB4 Mab-7. In the future, the use of anti-EphB4 antibodies in normal cells and in EphB4-specific cells will be implemented. In vitro, in vivo and in vivo, specific anti-EphB4 antibodies are used to detect anti-tumor effects.

项目成果

Defucosylated Mouse-Dog Chimeric Anti-Human Epidermal Growth Factor Receptor 2 Monoclonal Antibody (H77Bf) Exerts Antitumor Activities in Mouse Xenograft Models of Canine Osteosarcoma

去岩藻糖基化小鼠-狗嵌合抗人表皮生长因子受体 2 单克隆抗体 (H77Bf) 在犬骨肉瘤小鼠异种移植模型中发挥抗肿瘤活性

• DOI: 10.1089/mab.2022.0022
• 发表时间: 2023
• 期刊: Monoclonal Antibodies in Immunodiagnosis and Immunotherapy
• 作者: Nanamiya Ren;Ohishi Tomokazu;Suzuki Hiroyuki;Mizuno Takuya;Yoshikawa Takeo;Asano Teizo;Tanaka Tomohiro;Kaneko Mika K.;Kato Yukinari
• 通讯作者: Kato Yukinari