新規C型レクチン受容体Clec12bの機能の解明とその治療応用

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接触性皮膚炎モデルであるcontact hypersensitivity (CHS) は、原因物質を樹状細胞がT細胞に提示する感作相と、再び同抗原が侵入した際の炎症応答である誘発相から成る。FITCの皮膚への塗布は、マスト細胞の活性化を介してCHSを誘導する。感作相においてマスト細胞は、サイトカインであるTNF-α、IL-1や脂質メディエーターを産生し、樹状細胞の所属リンパ節への遊走を誘導する。誘発相では、ヒスタミン等の炎症性メディエーターを放出し、血管透過性を増加させて皮膚炎を増強する。野生型及びClec12b-/-マウスに対しFITCを用いてCHSを誘導したところ、Clec12b-/-マウスにおいて耳介の肥厚が亢進した。また、FITC感作後の鼠経リンパ節へ遊走したFITC陽性樹状細胞がClec12b-/-マウスで増加していた。次に感作相におけるClec12bの機能を解明するため、FITC 塗布後の皮膚を採取し、マスト細胞におけるサイトカインの産生及び残留する顆粒量を評価したが、サイトカイン量は検出限界以下であり、顆粒の残留量に差はみられなかった。このことから、Clec12b-/-マウスでは、FITCによる感作後に炎症が亢進することが明らかになったが、感作後の皮膚を用いた皮膚マスト細胞の評価は難しいと判断した。そこで次年度は、Clec12bを強制発現させた骨髄由来マスト細胞を、FITCによる感作後にケラチノサイトから放出されるATPといったダメージ関連分子パターンを用いて刺激し、上清中のサイトカイン及びβ-hexosaminidase量を解析する。また、当初の計画通りトリニトロフェノール (TNP) 特異的IgE及びTNP化した抗Clec12bモノクローナル抗体を用いて、FcεRI及びClec12bを架橋して刺激し、Clec12bの抑制分子機構を解析する。