新規C型レクチン受容体Clec12bの機能の解明とその治療応用

新型C型凝集素受体Clec12b的功能阐明及其治疗应用

• 批准号: 22KJ0436
• 负责人: 飯島 綾菜
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ0436/
• 关键词: 皮膚マスト細胞; C形レクチン受容体; 抑制性受容体; アレルギー性皮膚炎

接触性皮膚炎モデルであるcontact hypersensitivity (CHS) は、原因物質を樹状細胞がT細胞に提示する感作相と、再び同抗原が侵入した際の炎症応答である誘発相から成る。FITCの皮膚への塗布は、マスト細胞の活性化を介してCHSを誘導する。感作相においてマスト細胞は、サイトカインであるTNF-α、IL-1や脂質メディエーターを産生し、樹状細胞の所属リンパ節への遊走を誘導する。誘発相では、ヒスタミン等の炎症性メディエーターを放出し、血管透過性を増加させて皮膚炎を増強する。野生型及びClec12b-/-マウスに対しFITCを用いてCHSを誘導したところ、Clec12b-/-マウスにおいて耳介の肥厚が亢進した。また、FITC感作後の鼠経リンパ節へ遊走したFITC陽性樹状細胞がClec12b-/-マウスで増加していた。次に感作相におけるClec12bの機能を解明するため、FITC 塗布後の皮膚を採取し、マスト細胞におけるサイトカインの産生及び残留する顆粒量を評価したが、サイトカイン量は検出限界以下であり、顆粒の残留量に差はみられなかった。このことから、Clec12b-/-マウスでは、FITCによる感作後に炎症が亢進することが明らかになったが、感作後の皮膚を用いた皮膚マスト細胞の評価は難しいと判断した。そこで次年度は、Clec12bを強制発現させた骨髄由来マスト細胞を、FITCによる感作後にケラチノサイトから放出されるATPといったダメージ関連分子パターンを用いて刺激し、上清中のサイトカイン及びβ-hexosaminidase量を解析する。また、当初の計画通りトリニトロフェノール (TNP) 特異的IgE及びTNP化した抗Clec12bモノクローナル抗体を用いて、FcεRI及びClec12bを架橋して刺激し、Clec12bの抑制分子機構を解析する。

Contact hypersensitivity (CHS) is the cause of inflammation in contact dermatitis. It is also the cause of inflammation in dendritic cells and T cells. FITC skin coating, cell activation and CHS induction In response to the induction of TNF-α, IL-1 and lipid metabolism in dendritic cells, the migration of dendritic cells to their own cells was induced. Inflammatory disorders such as inflammation, inflammation, and inflammation Wild type and Clec 12 b-/- The number of FITC positive dendritic cells increased after FITC induction. The function of Clec 12b is explained in detail in the next step. The amount of particles produced in the skin after FITC coating is evaluated. The amount of particles produced in the skin after FITC coating is below the detection limit. The difference in the amount of particles remaining is also evaluated. C12b-/C12b In the next year, Clec 12b stress was detected in the cells, FITC, and the release of ATP and related molecules was analyzed by medium stimulation, supernatant and β-hexosaminase. In addition, the original project was to analyze the molecular mechanism of Clec 12b inhibition by using anti-Clec 12b anti-Clec 12b antibodies, FcεRI and Clec 12b bridging stimulators, through the analysis of specific IgE and TNP.

项目成果

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