Naive型ウサギ多能性幹細胞の樹立と胚盤胞補完法による膵臓再生への利用

囊胚互补法建立幼稚兔多能干细胞并用于胰腺再生

• 批准号: 22KJ1490
• 负责人: 岩月(中山) 研祐
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo (2023)Shinshu University (2021-2022)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ1490/
• 关键词: 多能性幹細胞; エピゲノム

当該年度は昨年度に引き続き、当初予定していた研究課題を転換及び発展させ、ラットを用いて多能性幹細胞における普遍的な未分化維持機構の解明、及び各発生段階を反映した新規幹細胞の樹立に取り組んだ。特に、着床後のエピブラストの多能性を反映した Primed 型のエピブラスト幹細胞は、これまで分化した細胞が混在した不均一な状態での培養が一般的であり、樹立や維持は非効率であった。そこでまず、ラットエピブラスト幹細胞 (rEpiSC) を安定に樹立・維持可能な培養条件を検討したところ、Rho/ROCK シグナルの恒常的な阻害と WNT シグナルの強力な阻害により、分化細胞の出現を抑えて均一な未分化性を示す rEpiSC の樹立に成功し、rEpiSC を安定に樹立・維持できる新規の培養系として確立した。そこで次に、この培養系を用いて培養された rEpiSC がどの発生段階を反映しているのかを評価した。その結果、rEpiSC を着床前の胚盤胞に移植して発生を進めても移植した細胞は生着せず、胎仔のキメラ形成は確認できなかったが、免疫不全マウスの精巣に移植すると、外胚葉・中胚葉・内胚葉のそれぞれに特徴的な組織構造を持つテラトーマの形成が確認できた。さらに、rEpiSC から胚葉体を形成させ BMP で刺激すると、始原生殖細胞様細胞を分化誘導でき、誘導された始原生殖細胞様細胞を生殖細胞を欠損するラット新生仔精巣に移植すると精子形成可能で、得られた精子細胞はラット未受精卵への顕微授精により産仔作出が可能であることが明らかとなった。このように、新規の培養系で維持された rEpiSC は三胚葉への分化誘導だけでなく生殖細胞への分化誘導も可能であったことから、三胚葉及び生殖細胞への運命決定が始まる原腸陥入前の発生段階を反映していることが示唆された (岩月ら、第45回日本分子生物学会、2022年)。

When the annual は yesterday annual に indexing き 続 き, had designated し て い た research topic を planning in and び 発 exhibition さ せ, ラ ッ ト を with い て pluripotent stem cells に お け る common な undifferentiated keep agency の uttered, and び each 発 Duan Jie を reflect し た の new rules on stem cells establish に group take り ん だ. に, after implantation の エ ピ ブ ラ ス ト の pluripotency を reflect し た Primed type の エ ピ ブ ラ ス は ト stem cells, こ れ ま で differentiation し が た cells mixed with し た heterogeneity な state で の cultivate が general で あ り, sets up the や maintain は non working rate で あ っ た. そ こ で ま ず, ラ ッ ト エ ピ ブ ラ ス ト stem cells (rEpiSC) を settle に may establish, maintain な culture conditions を beg し 検 た と こ ろ, Rho/ROCK シ グ ナ ル の constant な resistance against と WNT シ グ ナ ル の powerful な resistance against に よ り, differentiated cells appear の を え suppression て uniform な undifferentiated sex を す rEpiSC <s:1> established に successfully <e:1>, rEpiSC を was stable に established · maintained で る る new regulations <e:1> cultivation department と て established た. そ こ で に, こ を の training department with い て cultivate さ れ た rEpiSC が ど の 発 raw Duan Jie を reflect し て い る の か を review 価 し た. Youdaoplaceholder0 そ result, rEpiSC を before implantation の に blastoderm cell transplantation し て 発 raw を into め て も transplantation し は た cells with せ ず, tire seed の キ メ ラ form は confirm で き な か っ た が, incomplete immune マ ウ ス の fine 巣 に transplantation す る と, leaf, mesoderm, embryonic germ layer in の そ れ ぞ れ に 徴 な organizational structures を hold つ テ ラ ト ー マ の form が confirm で き た. Youdaoplaceholder0, rEpiSC ら, blastoderm を form させ BMP で stimulus す る と, others in primordial germ cells in the beginning を induction で き, induced さ れ た beginning primordial germ cells others を germ cell を owe loss す る ラ ッ ト newborn larvae fine 巣 に transplantation す る と spermatogenesis may で, have to ら れ た sperm cells は ラ ッ ト unfertilized egg へ の 顕 micro fertilization に よ り litter may make が で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. こ の よ う に, new rules の cultivate department で sustain さ れ た rEpiSC は three germ layer へ の induction だ け で な く germ cell へ の induction も may で あ っ た こ と か ら, three germ layer and び reproductive cells へ の destiny decided が beginning ま る archenteron 陥 into the former の 発 raw Duan Jie を reflect し て い る こ と が in stopping さ れ た (Iwaki ら, 45th Japanese Society for Molecular Biology, 2022).

项目成果

ラット Naive 型多能性幹細胞におけるゲノムインプリンティング消去回避の試み

尝试避免大鼠幼稚多能干细胞中基因组印记的擦除

• 发表时间: 2021
• 作者: 岡本恭弥;顧淳祉;張潮;山本雅道・小田悠介・市川雄貴・宮原裕一・笠原里恵;市川雄貴・宮原裕一;市川雄貴・宮原雄一;岩月研祐;岩月研祐
• 通讯作者: 岩月研祐

ラットエピブラスト幹細胞を安定に樹立・維持可能な培養条件の確立

建立能够稳定建立和维持大鼠外胚层干细胞的培养条件

• 发表时间: 2022
• 作者: 岡本恭弥;顧淳祉;張潮;山本雅道・小田悠介・市川雄貴・宮原裕一・笠原里恵;市川雄貴・宮原裕一;市川雄貴・宮原雄一;岩月研祐
• 通讯作者: 岩月研祐