Comparison of humoral responses induced by COVID-19 infection and mRNA vaccines.

点击翻译按钮获取中文摘要

昨年度は、COVID-19ワクチン接種者と、COVID-19患者の血清ライブラリ選抜とウイルス中和試験、及びペプチドアレイの作成を実施した。血清ライブラリ選抜においては、COVID-19患者群のうち、全身性の臨床症状を経た中等症者と重症者の患者血清と、ワクチン接種者血清からなる血清ライブラリを選抜した。その結果、患者群より２０サンプル、ワクチン接種者群より２１サンプル、計４１サンプルを得た。それぞれの群の血清は、受容体結合ドメイン(RBD)に対する抗体価が同程度であるものを選抜した。これらの血清を使用し、ウイルス中和試験を実施した。BSL3実験室で、Wuhan株のSARS-CoV-2を使用し、両群血清を用いたウイルス中和試験を行い、感染培養細胞の細胞変性効果の程度でウイルス中和活性を測定した。この中和活性の強弱の結果をもとに、エピトープ解析対象とする血清を、患者血清１０サンプル、ワクチン血清５サンプル選別した。両群のウイルス中和能は、ばらつきが同程度となるよう考慮した。次に、RBDのアミ ノ酸全長配列をもとに、ペプチドアレイを作成した。具体的には、RBD配列のN末端から15ペプチド鎖ずつ、3アミノ酸ずらしで、セルロースメンブレン上にペプチドスポットアレイを作成した。このアレイを、両群より選抜した血清と反応させた。反応のあったペプチドを、化学発光法により半定量評価し、各血清のエピトーププロファイルを得た。