微生物細胞内での組換えDNAの形質発現

重组DNA在微生物细胞中的表达

• 批准号: 60106006
• 负责人: 中沢 淳
• 金额: $ 14.08万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Special Project Research
• 财政年份: 1985
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1985 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60106006/
• 关键词: 組換えDNA; 微生物; 大腸菌; シュードモナス; 酵母; 転写制御; 枯草菌

組換えDNA実験に最もよく用いられる大腸菌について、熱ショック蛋白のオペロン群(由良)、ペニシリン結合蛋白遺伝子(鈴木)、溶菌ファージBF23の遺伝子群(溝渕)、リン酸レギュロン(品川)などの効率よく発現し、しかも発現制御をうける遺伝子のプロモータ領域の性貭と制御機構の解析を行った。また、シュドモナス、酵母および枯草菌をとりあげ、トルエン分解遺伝子群(中沢)、カンファ一酸化遺伝子群(堀内)、ガラクトース代謝系遺伝子(深沢)および胞子形成遺伝子(小林)の形貭発現と制御機構を解析し、それぞれの微生物細胞での転写機構の特徴を明らかにした。さらに、大腸菌細胞での異種生物遺伝子、たとえばシュードモナストルエン分解遺伝子群(中沢)、クレブシェラ窒素固定遺伝子(魚住)、葉緑体のtRNA遺伝子(井口)、ヒトカルシトニン遺伝子(品川)などの発現を解析し、同種細胞での発現との差違を検討した。微生物遺伝子の正の調節機構については、昨年までに明らかになっていた、大腸菌h姿pR,シュードモナスxylR,枯草菌spoG【II】に加えて、phoB、xylS、nifAなどの正の調節遺伝子が塩基配列のレベルで解明され、いずれの遺伝子産物もDNA結合蛋白としての特徴をもつことが明らかにされた。さらに、調節蛋白の標的DNA配列に関して、大腸菌リン酸レギュロンのプロモーター領域にPhoB蛋白の結合配列と考えられる塩基配列が同定され、窒素固定遺伝子のプロモーター領域および、意外なことにはシュードモナストルエン分解系遺伝子のプロモーター領域にntrA遺伝子産物の標的配列が存在することが明らかになった。また、酵母ガラクトース代謝系遺伝子の上流に存在する転写開始に必須な配列UASの芯になる配列を確定することができ、ここに正の調節因子Ga14蛋白が結合することが明らかにされた。

Group in え DNA be 験 に most も よ く with い ら れ る coliform に つ い て, hot シ ョ ッ ク protein の オ ペ ロ ン group (good), ペ ニ シ リ ン binding protein heritage 伝 (suzuki), lysis フ ァ ー ジ BF23 の heritage 伝 subgroup (ditch 渕), リ ン acid レ ギ ュ ロ ン (shinagawa) な ど の sharper rate よ く 発 し, し か も 発 now suppression を う け る heritage 伝 son の プ Youdaoplaceholder0 ロモ タ タ domain <s:1> nature と governing body <e:1> analysis を line った. ま た, シ ュ ド モ ナ ス, yeast お よ び hay bacteria を と り あ げ, ト ル エ ン decomposition heritage 伝 subgroup (ohsawa), カ ン フ ァ traces of a acidification 伝 subgroup (Mr), ガ ラ ク ト ー ス metabolic system heritage 伝 child (deep ohsawa) お よ び spore forming but 伝 son (Lin) の 貭 発 と imperial institutions を analytic し, now そ れ ぞ れ の microbial cells で の の planning write mechanism, 徴 を Ming ら に に た. さ ら に, coliform cell で の heterogeneous biological heritage 伝, た と え ば シ ュ ー ド モ ナ ス ト ル エ ン decomposition heritage 伝 subgroup (ohsawa), ク レ ブ シ ェ ラ smothering element fixed heritage の 伝 (fish), chloroplast tRNA heritage 伝 (well), ヒ ト カ ル シ ト ニ ン heritage 伝 child (shinagawa) な ど の 発 を analytic し now, the same cells で の 発 now と の poor violations を beg し 検 Youdaoplaceholder0. Microbial heritage 伝 son の is の regulator に つ い て は, yesterday ま で に Ming ら か に な っ て い た, coliform h, pR and シ ュ ー ド モ ナ ス xylR, hay bacteria spoG [II] に plus え て, phoB, xylS, nifA な ど の is の adjust heritage 伝 son が salt base with column の レ ベ ル で interpret さ れ, い ず れ の heritage 伝 zi chan も D Na-binding protein と と て て <s:1> characteristics を を とが とが Ming ら とが にされた にされた にされた. さ ら に, regulatory proteins の target DNA match column に masato し て, coliform リ ン acid レ ギ ュ ロ ン の プ ロ モ ー タ ー field に PhoB protein の combined with column と exam え ら れ る salt base with column が with fixed さ れ, smothering element fixed but 伝 の プ ロ モ ー タ ー field お よ び, accident な こ と に は シ ュ ー ド モ ナ ス ト ル エ ン decomposition of heritage 伝 son の プ ロ モ ー タ ー The domain にntrA legacy 伝 sub-products <s:1> subject matter allocation が exists する とが とが and ら ら になった. ま た, yeast ガ ラ ク ト ー ス metabolic system heritage 伝 son の upper に exist す る started に must な planning write columns UAS の core に な る match column を determine す る こ と が で き, こ こ に is の adjustment factor Ga14 protein が combining す る こ と が Ming ら か に さ れ た.

项目成果

J.Bacteriol.164-1. (1985)

J.Bacteriol.164-1。

Mol.Cell.Biol.6-1. (1986)

分子细胞生物学6-1。

Gene. 39-1. (1985)

基因。

J.Bacteriol.163-3. (1985)

J.Bacteriol.163-3。

Mol.Gen.Genet.199-2. (1985)

Mol.Gen.Genet.199-2。