大腸菌secY遺伝子産物の精製とタンパク質分泌における機能の解析

大肠杆菌secY基因产物的纯化及其蛋白分泌功能分析

• 批准号: 60214022
• 负责人: 伊藤 維昭
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Special Project Research
• 财政年份: 1985
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1985 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60214022/
• 关键词: 蛋白質膜透過; 分泌; 膜蛋白質; 電気泳動法

大腸菌において表層タンパク質の膜透過反応に必須の役割を持つ遺伝子secYの産物を同定し、この蛋白質が細胞質膜の内在性膜蛋白質であることを明らかにした。これらの研究において、まずsecY遺伝子をクローン化したプラスミドを用いてSecY蛋白質を過剰生産させる系を作成した。本蛋白質の過剰生産は細胞にとって致死的であった。また過剰生産されたsecY蛋白質の細胞内における安定性などを調べ、本蛋白質を蓄積させる条件を設定した。一方、SecY等の内在性膜蛋白質の解析を容易にするため、新しい電気泳動法を開発した。今回開発した「SDS-SDS二次元泳動法」、「detergent blotting法」、およびこれらを組み合せた「三次元泳動法」により、SecYをはじめとする一群の膜蛋白質の分離同定が可能となった。

It is necessary to control the concentration of secY in the membrane after the membrane is passed through the membrane. It is necessary to determine the content of the protein in the cell membrane. In this study, the secY protein was used to make the product, and the SecY protein was used to make the system. This protein is sensitive to the death caused by the death of human cancer cells. The production of secY protein, the stability of intracellular protein, the stability of this protein, and the condition setting of this protein were detected. One side, SecY and other intrinsic membrane protein analysis methods are easy to start, and the new method of electronic swimming is easy to start. This time, the "SDS-SDS two-dimensional Swimming method", the "detergent blotting method", the "three-dimensional Swimming method" and the "three-dimensional Swimming method" have been developed, and a group of membrane proteins have been separated from each other.

项目成果

化学と生物. 23-3. (1985)

化学与生物学。23-3。

細胞工学. 4-13. (1985)

细胞工程。4-13。

Biochem.Biophys.Res.Commun.133-1. (1985)

Biochem.Biophys.Res.Commun.133-1。