神経芽細胞に対するモノクローナル抗体の作製および腫瘍抗原解析に関する研究

神经母细胞单克隆抗体制备及肿瘤抗原分析研究

• 批准号: 60570576
• 负责人: 北村 道彦
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1985
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1985 至 1986
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60570576/
• 关键词: 神経芽腫; モノクローナル抗体; 免疫組織染色; フローサイトメトリー; シスプラチン

1.昭和60年度に作製し、各種実験によりスクリーニングされて得られた4種のモノクローナル抗体(MWT-31,N-14-4,T-93-13,G-16-2-D)に対して、各種培養細胞株(26種,56株)による抗原解析と、免疫組織染色による特異性の検討を行った。2.MWT-31(Ig【G_1】)とN-14-4(Ig【G_1】)は、神経芽腫と末梢神経に対し高い特異性を示し、その他、奇形腫や9週令の胎児の未熟な神経線維をも認識していた。両抗体の対応抗原を有する細胞株の分布は、N-14-4の方が広いものの同じ様な分布を示した。これは、フローサイトメトリーを用いた細胞膜抗原の解析の結果、陽性率が同じであった事から、N-14-4はその抗体価が高いのみで、同じ抗原を認識しているもとのと思われた。3.T-93-13(IgM)は、細胞膜上の抗原を認識する抗体で、比較的神経芽腫に対する特異性が高く、ホルマリン固定パラフィン包埋切片でも、その抗原性を失わず、臨床材料を用いた免疫組織染色の結果、神経芽腫の病理組織学的診断に有用と思われた。4.G-16-2-D(Ig【G_(26)】)は、培養細胞株では神経芽腫とのみ陽性を示し、その特異性は非常に高いが、免疫組織学的には、神経芽腫に対して弱陽性反応しか示さなかった。これは、フローサイトメトリーによる培養細胞株の細胞膜抗原の解析の結果、陽性率は60%台であり、対応抗原を有する細胞の割合が少ない為であろうと思われた。しかも、抗癌剤であるシスプラチン3μg/mlを48時間接触させた後の陽性率が95%以上となった事から、本抗体は神経芽腫の予後判定に非常に有用であると思われた。5.以上、種々の実験の結果、我々の作製した4種のモノクローナル抗体は臨床的に非常に有用と思われ、更に、現在、骨髄細胞との反応性や、血清診断,抗腫瘍性を検討中である。

1. In 2006, four kinds of antibodies (MWT-31, N-14 -4,T-93-13,G-16-2-D) were produced for various kinds of culture cell lines (26 kinds, 56 strains), antigen analysis and specific assay for immunostaining were studied. 2. MWT-31(Ig [G_1]) and N-14 -4(Ig [G_1]) showed high specificity in neurogenesis and peripheral neurogenesis. The distribution of the antibody to the antigen in the cell line is shown in the same way as in the N-14 -4 cell line. The results of membrane antigen analysis and positive rate of N-14 -4 antibody analysis are the same as those of N-14 -4 antibody analysis. 3. T-93-13(IgM) is useful for the identification of antigens on cell membranes, for comparison of specificity of neuroblastoma, for fixation of neuroblastoma embedded sections, for identification of antigenicity of neuroblastoma, and for the diagnosis of neuroblastoma pathologically. 4. G-16-2-D(Ig [G_(26)]) was highly specific and immunohistologically positive in cultured cell lines. The results of membrane antigen analysis of cultured cell lines showed that the positive rate was 60%, and the number of cells with antigen was less than 60%. The positive rate of anti-cancer antibody was more than 95% after 48 hours of exposure. The antibody was very useful for the determination of neuroblastoma. 5. The results of the above studies, the preparation of the four kinds of anti-tumor antibodies, are very useful in clinical studies, such as bone marrow cells, anti-tumor antibodies, serum diagnostics, and anti-tumor antibodies.