Aquaporins: search for AQP-6 in the inner ear, expression, characterization, regulation of AQP-2

水通道蛋白：在内耳中寻找 AQP-6，AQP-2 的表达、表征和调节

• 批准号: 5211568
• 负责人: Professor Dr. Eric Beitz
• 金额: --
• 依托单位: Pharmazeutisches Institut
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Fellowships
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1998-12-31 至 2000-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5211568?language=en
• 关键词: Aquaporins; search; AQP; inner; ear

Zelluläre Wasserkanäle, Aquaporine (AQP), ermöglichen einen schnellen und regulierbaren Transport selektiv von Wasser und kleinen ungeladenen Molekülen über Zellmembranen entsprechend dem osmotischen Gradienten. Im Sammelrohr der Niere befindet sich Vasopressin reguliertes AQP-2, dessen Mutation nephrogenen Diabetes insipidus auslöst. Eine Dysregulation u.a. des Endolymphvolumens im Innenohr ist Ursache für Schwindel und Hörverlust (Morbus Ménière). Wir haben AQP-2 (neben AQP-1, -3, -4 und -5) und den V2-Vasopressinrezeptor im Innenohr nachgewiesen. Der Vasopressineffekt im Innenohr ist jedoch invers zum Sammelrohr, d.h. AQP-2 wird negativ reguliert. Ich möchte die Bedeutung der AQPe für die Innenohrfunktion weiter untersuchen durch: 1) Suche nach dem bislang nierenspezifischen AQP-6 mit RT-PCR und, falls vorhanden, Hefeexpression und Charakterisierung. 2) Identifizierung regulativer Proteine des AQP-2 durch Chromatographie an mit phosphoryliertem AQP-2 gekoppelten Affinitätsmaterial und Immunpräzipitation von AQP-2-Proteinkomplexen. AQP-2 wird mit N-terminalem myc-tag in Hefe exprimiert, gereinigt und mit Sammelrohr-Zelllysat homogenisiert. Komplexe werden mit anti-myc-Antikörpern gefällt und isolierte Proteine ansequenziert.

水通道、水通道蛋白 (AQP)、水通道运输和小分子膜渗透梯度的调节和调节。我的 Sammelrohr der Niere 发现加压素调节 AQP-2，即肾原性突变尿崩症。 Eine 失调 u.a. des Endolymphvolumens im Innenohr ist Ursache für Schwindel und Hörverlust (Morbus Ménière)。 Wir haben AQP-2（neben AQP-1、-3、-4 和 -5）和 V2-加压素受体在 Innenohr nachgewiesen 中。 Der Vasopressineffekt im Innenohr ist jedoch invers zum Sammelrohr, d.h. AQP-2 负调节。 AQPe 的内部功能如下： 1) AQP-6 与 RT-PCR 结合使用，具有良好的表达、表达和特性。 2) 通过色谱法和 AQP-2 磷酸化亲和材料和 AQP-2-蛋白质复合体的免疫作用来鉴定 AQP-2 调节蛋白。 AQP-2 在 Hefe exprimiert、gereinigt 和 Sammelrohr-Zelllysat 匀浆中带有 N 末端 myc 标签。结合抗 myc-Antikörpern gefällt 和 isolierte Proteine ansequenziert。