各種制癌剤感受性試験法の基礎並びに臨床的研究

多种抗癌药物药敏检测方法的基础与临床研究

• 批准号: 61015029
• 负责人: 谷川 允彦
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: 福井医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61015029/
• 关键词: Scintillation Assay; Human Tumor Clonogenic Assay; Subrenal Capsule Assay; MTT Assay; ATP Assay

二層軟寒天培養法は、コロニー形成能を持つ腫瘍細胞を選択的に培養できるとしてヒト腫瘍の制癌剤感受性試験法Human Tumor Clonogenic Assay(HTCA)に応用されてきた。国際的な多施設で行なわれてきたHTCAはしかし、その低いコロニー形成率0.01〜0.0001%や手技的問題が多く、僅かに20〜30%の判定可能率を示すに過ぎないことが示されてきた。研究代表者谷川は、二層軟寒天培養法と【^3H】サイミディン摂取能を指標に腫瘍細胞のDNA合成能測定をHybridしたScintillation Assay(SA)を開発して1982年よHTCAと対比しながら検討してきた。このSAの改良系は現在NCI新制癌剤スクリーニング系にHTCAに代わって用いられている。本研究においてHTCA671例、SA383例の各種悪性腫瘍について検討してきた。判定可能率はHTCA59%,SA60%,臨床反応との相関性はHTCA41症例63回、SA32症例44回の相関においてtrue positive rateはHTCA52%,SA40%,true negative rateはHTCA95%、SA88%と凡そ同様の予言性を示している。これらの結果は、感受性判定に際して腫瘍細胞群をコロニー形成細胞のみに限定する必要の無いことを示唆している。またこれら臨床相関を臓器別、制癌剤別にそれぞれ検討するとMMC(3μg/ml)、5FU(10μg/ml)が至適in vitro濃度に比して格段に高いことが明らかとなった。SAの改良に向けてThymidine非含有培養液の使用,Agaroseの使用,Insuline・Hydrocortisone・EGFからなるHormone mixtureの使用,そしてlabeling effciencyからみて16mm dishの使用などが、判定可能率向上に極めて有用であることを実験的に明確にした。In vivo系として近年注目されているSubrenal Capsule Assayは判定時期の6日目には殆ど腫瘍細胞が死滅しており理論的裏付けに欠け、MTT、ATP Assayでは、線維芽細胞をはじめとした非腫瘍細胞との鑑別が不可能であり、各試験法の対象細胞群の明確化を次の研究課題とする。

Two-layer soft-cold culture method is used to develop tumor cell selection. Human Tumor Clonogenic Assay(HTCA) is used to test tumor cell selection. The international multi-application HTCA has a low probability of formation of 0.01 ~ 0.0001% and a high probability of determination of 20 ~ 30% for technical problems. The representative of the study, Tanigawa, developed the Hybrid Scintillation Assay(SA) in 1982. This SA improvement system is currently being used instead of HTCA for NCI's new cancer agent SUCRINEN. In this study, 671 cases of HTCA and 383 cases of SA were investigated. The true positive rate of HTCA 52%, SA 40%, true negative rate of HTCA 95%, SA 88%, true negative rate of HTCA41 cases 63, true negative rate of SA32 cases 44. These results indicate that there is no need to restrict the formation of tumor cell populations when sensitivity is determined. The concentration of MMC(3μg/ml) and 5FU(10μg/ml) in the vitro was higher than that in the control group. SA was improved to use Thymidine free medium,Agarose,Insuline·Hydrocortisone·EGF, Hormone mixture, labeling efficiency, 16mm dish, and determination probability. In vivo system, attention has been paid in recent years. Subrenal Capsule Assay is a new research topic for determining whether tumor cells are dead or not within 6 days. MTT, ATP Assay is a new research topic for determining whether tumor cells are dead or not.

项目成果

谷川允彦,森本秀樹,秋田利明,井上弘,田中猛夫: 癌と化学療法. 13. 1176-1184 (1986)

Masahiko Tanikawa、Hideki Morimoto、Toshiaki Akita、Hiroshi Inoue、Takeo Tanaka：癌症与化疗。13. 1176-1184 (1986)。

Kern,DH,Drogemuller,CR,Kennedy,MC,Hildebrand Zanki,SU,Tanigawa,N.,Sondak,VK: Cancer Research. 45. 5346-5441 (1985)

Kern，DH，Drogemuller，CR，Kennedy，MC，Hildebrand Zanki，SU，Tanikawa，N.，Sondak，VK：癌症研究。

Tanigawa,N.;Mizuno,Y.;Hashimura,T.;Lee,K.;Dohmae,N.;Hikasa,Y.;Kern,DH.;Morton,DL: Br.J.Cancer.

谷川，N.；水野，Y.；桥村，T.；李，K.；道前，N.；日笠，Y.；克恩，DH.；莫顿，DL：Br.J.癌症。

谷川允彦: "制癌剤感受性の決定(12.Scintillation assayによる感受性試験)" 金原出版株式会社, 234 (1985)

谷川雅彦：“抗癌药物敏感性的测定（12.使用闪烁试验的敏感性试验）”金原出版有限公司，234（1985）

Matsumoto,S.;Yamamoto,A.;Takahashi,Y.;Hashida,M.;Tanigawa,N.;Sezaki,H.: Cancer Research. 46. 4463-4468 (1986)

松本，S.；山本，A.；高桥，Y.；桥田，M.；谷川，N.；濑崎，H.：癌症研究。