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細胞工学的手法による昆虫の遺伝子発現の研究

利用细胞工程方法研究昆虫基因表达

基本信息

批准号：
61304001
负责人：
黒田行昭
金额：
$ 9.79万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Co-operative Research (A)
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至 1988
项目状态：
已结题

项目摘要

昭和62年度は, 前年度の研究成果にもとづき, ショウジョウバエ, カイコ, ハエ, ハチなどの昆虫を用いて, 種々の細胞工学的手法により遺伝子発現に関する研究を行い, つぎのような成果を得た. 1.体外培養系を用いた研究では, 未分化な胚細胞から分化した成虫気管構造の形成過程を微細構造の上から詳細にしらべることができ(黒田), copiaの遺伝子導入系を確立してウイルス粒子産生を証明し, その塩基組成がウイルス粒子産生に関連することを見出した(三宅). 2.卵の前極細胞質の後極への移植では, 双頭胚が得られ, 前年度得られた結果と合わせて, 3種の細胞質因子モデルを提案した(岡田). また, 間接飛翔筋特異的なアクチン遺伝子の1アミノ酸置換変異を作成し, P因子法で染色体に導入してその生理的効果をしらべた(堀田). 動く遺伝子トランスポゾンtomについては塩基配列を決定し, 挿入地点にATATの特異的塩基配列があることが分り, これを複眼形成遺伝子に挿入した(西郷). 3.遺伝子クローニングにより, トランスポゾンP因子の1部欠失したものがトランスポゼース活性の抑制タンパク質を産生していることを見出した(山崎). また, ショウジョウバエのホメオボックス配列をプローブとして, カイコのホメオチック遺伝子をクローニングし, その塩基配列を決定し, この遺伝子の発現は胚の体節化, 器官形成期, 幼虫の胸節, 腹節で発現することを明らかにした(鈴木). プローブDNAと試料DNAとの分子雑種作成の後, プローブに結合する二次プローブを作用させ, 特異配列のDNAを感度よく検出する方法を開発した(小穴). また, 卵形異常系統ではその卵構成タンパク質の翻訳活性の低下を観察した(坂口). 4.センチニクバエの生体防御タンパク質のcDNAクローンの単離に成功し, その全塩基配列を決定した(名取). カイコの培養細胞および後部絹糸腺の器官培養系への遺伝子導入を行った(前川)

In Showa 62, the research results of the previous year were obtained. 1. In vitro culture system research, undifferentiated embryo cells from differentiation to adult tube structure formation process, fine structure of the detailed study (Kuroda), copia gene introduction system to establish and prove its particle production, and its matrix composition related to its particle production (Miyake). 2. The transfer of cytoplasm from the anterior pole to the posterior pole of the egg resulted in the formation of a double head embryo, and the formation of three cytoplasmic factors (Okada). In addition, the indirect flight tendon specific gene and 1-acid substitution variant were created, and the P factor method was used to introduce the physiological effects of chromosome (Hita). In addition, the base arrangement of ATAT is determined by the position of ATAT, and the compound eye is formed by the position of ATAT. 3. The first part of P factor is missing, and the second part of P factor is missing. The development of the embryo, the organogenesis, the development of the larva's thoracic segment, and the development of the larva's ventral segment are determined by the selection and arrangement of the embryo's base. After preparation of molecular species of DNA and sample DNA, the method of DNA sensitivity detection for specific alignment was developed. Oval abnormal system is composed of egg, and the activity of inversion is low. 4. The biological defense system of CDN was successfully isolated from cDNA library, and the whole nucleotide sequence was determined (named). The introduction of gene into cultured cells and organ culture systems of posterior serous glands (Maekawa)