動物由来モービリウイルスの遺伝子解析

动物源性运动病毒的遗传分析

基本信息

批准号：
61560335
负责人：
吉川泰弘
金额：
$ 1.09万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61560335/
关键词：
牛疫ウイルス H蛋白遺伝子モービリウイルス糖蛋白塩基配列

项目摘要

牛疫ウイルス感染Vero細胞からmRNAを抽出し、岡山-Berg法により牛疫ウイルスmRNAに対するcDNAライブラリーを作成することに成功した。牛疫ウイルスの糖蛋白および殻蛋白をコードしているmRNA(H,F,NP,P,M)に対するcDNAはいずれも各mRNAの全長をカバーしている事が明らかになったので、生物学的に特に重要と考えられるH遺伝子のCDNAについて塩基配列の解析を行なった。その結果、牛疫ウイルスのH遺伝子は1952塩基からなり、中央に長いリーディングフレームを持ち、609個のアミノ酸をコードしていると考えられた。N末端に比較的長い疎水性アミノ酸領域がみられたが、C末端には特に疎水性領域がない為に、インフルエンザウイルスのNA蛋白と同様、N末端が細胞内に残り(シグナルペプチドとトランスメンブレン領域の両方を兼ねる)、C末端が膜外に出ると思われる。中央部には、4ケ所糖鎖結合部位となり得るアミノ酸配列がみられた〔NSS(168-170),NMS(200-202),NIS(215-217),NST(365-317)〕。既に塩基配列が決定されている麻疹ウイルスHA蛋白の遺伝子と比較すると、mRNAの5'末端側(1-485)では75.1%、中央部(486-1310)では49.5%、3'末端側(1311-1850)では63.3%の塩基配列が一致しており、両ウイルスが比較的近い関係にあることが示された。しかし、宿主域や感受性細胞に侵入する際に重要と考えられる糖鎖結合部位を含む領域では、互いに異なっている事が明らかになった。これらの結果は、モノクローナル抗体を用いた両ウイルスの糖蛋白の分析結果とよく一致している。Cos細胞を用いた発現系で、このCDNAは牛疫ウイルスH蛋白を発現する事が確かめられたので、現在ワクチニアウイルスに組込んでベクターワクチンの作成を行なっている。

从感染了Rinderpest病毒的Vero细胞中提取mRNA，并使用冈巴伯格方法来创建用于rinderpest病毒mRNA的cDNA库。据透露，编码Rinderpest病毒的糖蛋白和壳蛋白的mRNA（H，F，NP，P，M）覆盖了每个mRNA的全长，因此分析了H基因的CDNA的碱基序列，这在生物学上特别重要。结果，rinderpest病毒的H基因由1952年的碱基组成，中间有较长的阅读框，被认为编码609个氨基酸。在N末端发现了一个相对较长的疏水氨基酸区域，但是由于C末端没有特别的疏水区域，因此似乎N末端仍然存在于细胞中（既充当信号肽和跨膜区域），并且C-末端似乎是由膜的Na-na protistance na na protistance and the Membrane aftist ryanify a the Membrane na protist ryanist ryanif的影响。在中心部分，发现可能是糖基化结合位点的氨基酸序列（NSS（168-170），NMS（200-202），NIS（215-217），NST（365-317）]。 49.5％的中央部分（486-1310），在3'-末端（1311-1850）中有63.3％，表明两个病毒相对较近，但是，宿主区域和区域均表明糖基化位点，这些区域在与其他结果相关的敏感细胞时都很重要。使用单克隆抗体的病毒已证实，该cDNA在表达系统中使用COS细胞表达了Rinderpest病毒H蛋白，目前正在掺入疫苗病毒中以创建载体疫苗。