超高圧電子顕微鏡による脳腫瘍細胞の立体観察

超高压电镜三维观察脑肿瘤细胞

• 批准号: 61570699
• 负责人: タオ本 勝司
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61570699/
• 关键词: グリオーマ; 細胞骨格; 中間系フィラメント; GFAP; ビメンチンフィラメント; 免疫電顕法; 金コロイド; 電顕立体観察

実験脳腫瘍細胞並びにヒトグリオーマ培養細胞の微細形態を立体的に観察し特に細胞骨格の存在形式及び分布を詳細に検討することを目的として、ヒトグリオーマ細胞株KNS-42を中心に研究を行なった。細胞はフォルムバール膜をはったサーモノックス板上に培養し、中間系フィラメントを検討すべく一次抗体として抗GFAP、抗ビメンチン、抗ニューロフィラメント抗体、および抗アクチン抗体を用い、二次抗体は大きさの異なる金コロイド粒子を結合した抗IgG(兎及びマウス)、およびプロテインAゴールドを用いて免疫電顕染色を行なった。アクチンフィラメントは細胞核を中心に放射状に分布しており、細胞質全体に広がってnetworkを形成していた。中間系フィラメントのうちGFAPは束状に走行する傾向があり、特に細胞突起には多数のフィラメントが、マイクロチュブルスと共に走り、突起の骨格を形成していた。KNS細胞にはビメンチンフィラメントも多く認められたが、形態上はGFAPフィラメントとの鑑別は不可能であり、免疫電顕法により初めて同定可能であった。ビメンチンフィラメントはGFAPほど束状に走らず、細胞突起よりも細胞質の中心に近い部分に比較的多い傾向が認められた。金コロイドの大きさを変えることにより、GFAPとビメンチンフィラメントの二重標識が可能であり、検索した範囲では殆んどの中間系フィラメントは抗原性を異にしていた。しかし、ごく一部の10nmフィラメント上には、立体観察により、5nmと15nmの二種類の金コロイド粒子が認められた。これらの結果から、大きさの異なった金コロイドを用いる免疫二重標識により、形態学的には鑑別不可能な細胞骨格の抗原性の違いを同定することが可能であるが、同一フィラメントが抗原性を共有しているか否かに関しては、更に詳細な検討が必要である。

In order to improve the quality of the cells, we should make sure that the cells are microscopically shaped and stereoscopically, and that the existence form and distribution of the cells are observed. The purpose of this study is to study the KNS-42 cells. The primary antibody against GFAP, the antibody against IgG, the antibody against IgM, the antibody against HBsAg, the antibody against IgM, the primary antibody, the antibody, the antibody, the We need to use immunoelectrophoretic staining to make sure that the samples are not stained. The cells are distributed radially in the center of the nucleus, and the whole body of the cells is distributed. The network forms the nucleus. In the middle part of the family, the bundles of the GFAP are in the shape of the bundles, the cells are in the majority, the cells are in the majority, the bones are in common, and the bone lattice forms the bone lattice. It is not possible to detect KNS infection in the same way by immuno-electrophoretic method and immuno-electrophoretic method. The results show that it is not possible to determine that it is not possible to do so in terms of morphology and morphology, and that it is possible to use immuno-electric method. The proximal part of the central part of the cell is more directional than that of the middle part of the GFAP. This is the first time to know that there is a problem in the development of dual identifications. in this paper, the author points out that there are some problems in the field of dual identification, such as the possibility of identification, the possibility of double identification, and the possibility of dual identification. in the range of double tags, there is no difference between them. In the first 10nm movie, there are three-dimensional inspection, 5nm, 15nm, gold, particles and so on. The results show that it is not possible to identify the antigenicity of the cellular skeleton by using the double immune marker, and it is impossible to identify the antigenicity of the cellular osse. the results show that the antigenicity of the cell is the same as that of the antigenicity, and that the antigenicity of the same population has the same antigenicity.