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クラミドモナス突然変異株を用いたダイニン内外腕機能の研究

使用衣藻突变株研究动力蛋白内臂和外臂功能

基本信息

批准号：
61580220
负责人：
神谷律
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61580220/
关键词：
クラミドモナス鞭毛繊毛ダイニン FFTアナライザー生体運動

项目摘要

鞭毛・繊毛運動において本質的に重要な役割を果しているダイニン腕の機能を明らかにする目的で、ダイニン内・外腕それぞれの全部または一部を欠失している突然変異株を単離し、その鞭毛の機能を解析する試みを行なった。今まで外腕欠失株は得られていたが、内腕に関しては部分的に欠失したものが一種得られているだけであったので、それぞれの腕の機能の違いはよくわかっていなかった。そこで今回は内腕異常株の単離を第一の目的とし、そのためにまずFFTアナライザーを用いて多数の株の鞭毛打頻度を簡便に測定する方法を開発した。さらに、これにより鞭毛打頻度の低下が確認された株のなかに、内腕部分欠損株の新種を2種見出した。これらの株の解析はまだ充分ではないが、電子顕微鏡による観察で、内腕が縮小して見えるという結果が得られている。興味深いことに、これらの内腕部分欠損株はそれぞれ一定の運動性を示すが、異なった部分に欠損を持つもの2種の2重変異株は運動性を失っていた。この結果は、ダイニン内腕が大きく欠損すると鞭毛が全く機能できなくなるという可能性を示唆するものである。しかし、この点を確定するには今後さらに多くの内腕変異株を用いて検討する必要があろう。ダイニンの機能を試験管内で発現させるという方向の研究の第一歩として、外腕欠失変異株の鞭毛軸糸に野生株鞭毛由来の外腕を結合させる試みを行った。大量に培養した野生株細胞をペリコンラボカセットで回収し、鞭毛軸糸と高塩濃度下で抽出してダイニン粗標品を得、外腕欠失軸糸に加えたところ、外腕が正しい位置に結合し、ATP存在下での運動性が野生株のものと同程度にまで回復した。この結果はダイニンの機能を試験管内で検定する道を拓いたものと考えられ、今後精製した標品やその一部を用いることにより、ダイニン内外腕国有の機能とそれぞれの機能部位を明らかにすることが可能になると期待される。

The essential function of the flagella is to analyze the function of the flagella. Now the outer arm is missing, the inner arm is missing, and the inner arm is missing. This paper introduces a simple method for determining the frequency of flagella in most plants by FFT. Two species of new species were identified, which were found to be deficient in flagella and flagella. The analysis of the plant is sufficient, and the electron microscope is used to observe the internal wrist. The result is obtained. In addition, there are two kinds of abnormal plants with different sports characteristics, namely, those with different sports characteristics. This result raises the possibility that the inner wrist of the needle may be damaged greatly and the flagella may be fully functional. This is the first time that we've been able to determine how many different plants we need to use in the future. The first step of the study was to test the function of flagella in the tube and to test the origin of flagella in wild plants In large numbers, wild plants were cultured and recovered. The flagellum axis was extracted at high concentration. The crude standard was obtained. The outer arm was lost. The outer arm was combined at the middle position. The motility of wild plants was recovered in the presence of ATP. The result is that the function of the inner and outer parts of the tube is determined, and the function of the inner and outer parts of the tube is determined.