化学増幅を利用した高感度バイオセンサ

使用化学放大的高灵敏度生物传感器

基本信息

  • 批准号:
    62217008
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.22万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Special Project Research
  • 财政年份:
    1987
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1987 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1.目的 バイオセンサの中でも免疫センサは抗体分子のすぐれた分子識別機能を利用して複雑な有機物質を検出定量することのできるセンサであるが, その高感度化が要望されている. 本研究では特定抗体に対し均一な結合能を有するモノクローナル抗体を化学増幅機能を有する酵素で標識した複合体を分子識別機能物質として用いることにより, 高感度に抗原物質を検出定量するバイオセンサを設計作成することにした.2.方法および成果 肝腫瘍などの診断指標として最近重要視されてきているスーパーオキシドジスムターゼ(SOD)を測定対象とした. 抗体産生ハイブリドーマを用いてマウス腹水より生成した抗SODモノクローナル抗体に化学増幅機能の大きな酵素カタラーゼを化学結合させ, SOD標識分子とした. SODを結合した高分子膜を酸素電極に装着しSOD微量計測用センサとした. このセンサ部をカタラーゼ標識抗SOD抗体溶液に浸漬し, 免疫結合反応を行わせ, 洗浄後膜抗原に結合したカタラーゼ標識抗体の過酸化水素分解活性を酸素電極により電流計測し, 微量なSODと抗SOD抗体との結合反応を検出できることを示し, その応答特性を明らかにした. ついでセンサ部を測定対象SOD溶液浸漬し, カタラーゼ標識モノクローナル抗体を添加して膜結合SODと溶液中のSODへの競争結合反応を行わせ, 洗浄後センサ出力を測定することによって試料溶液中のSODを定量できることを示した. 微量な抗原-抗体反応が酵素反応によって増幅され, 大きな電流出力として計測され, 10-9〜10-7 g/mLの範囲のSODを検出定量できた.3.今後の展開 酵素の増幅機能を利用して高感度に抗原物質を検出定量する免疫センサの設計指針が得られたが, さらに分子識別反応を高感度に計測する方法として化学発光など光学的検出法の利用が有効であり, オプティカルバイオセンサの開発が期待できる.
1.Purposeバイオセンサの中でもimmune センサはantibody moleculeのすぐれたmolecule recognition functionをUtilize して雑なorganic matter を検出quantificationすることのできるセンサであるが, The key to high sensitivity is to achieve high sensitivity. The purpose of this study was to chemically enhance the specific antibody's uniform binding energy and the specific antibody's binding energy. Function: Enzyme, Identification Complex, Molecular Recognition Functional Substance, Use, High-sensitivity antigen substance を検出quantification するバイオセンサを design and production することにした. 2. Method および results Diagnostic index of hepatic swollen and ulcer disease. The most recent important observation is the measurement of liver swollen liver disease. Antibody production method Anti-SOD antibody production method Anti-SOD methodクローナルantibodyにchemical amplification functionの大きなzymeカタラーゼをchemical bindingさせ, SOD identification molecule is used for SOD micrometer measurement.このセンサ部をカタラーゼlabeled anti-SOD antibody solution に impregnated, Immunoconjugation reaction reaction, washed membrane antigen binding, labeling antibody, overacidified water decomposition activity, acid electrode, current measurement, Trace amounts of SOD and anti-SOD antibodies are combined with anti-SOD antibodies and anti-SOD antibodies.ついでセンサ部をMeasurement object SOD solution immersion,カタラーゼlabeled モノクローナルantibodyをaddedしてmembrane-bound SODとのSODへのcompetitive binding reaction in the solutionを行わせ, After washing, the SOD in the sample solution was measured and quantitatively measured using the SOD test solution. Trace amount of antigen-antibody reaction enzyme reaction reaction, large current output measurement, 10-9~10-7 g/mL の 囲 の SOD を 検 quantification で き た. 3. Future development の Enlargement function を utilization し て High sensitivity に Antigen substance を す る Immunity サ の Design guidelines が ら れ た が, It is a method of molecular recognition reaction, high sensitivity and measurement, and it is an effective method of chemical irradiation and optics.オプティカルバイオセンサの开発がLooking forward to できる.

项目成果

期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Masuo Aizawa: Phil.Trans.R.Soc.Lond.B316. 121-134 (1987)
相泽益雄:Phil.Trans.R.Soc.Lond.B316。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Masuo Aizawa: Proc.XIII Intl.Clin.Chem.(Hague). (1987)
Masuo Aizawa:Proc.XIII Intl.Clin.Chem.(海牙)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Masuo Aizawa(T.T.Ngo ed.): Electrochemical Sensors in Immunological Analysis. PLENUM. 269-278 (1987)
Masuo Aizawa(T.T.Ngo ed.):免疫分析中的电化学传感器。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Masuo Aizawa(T.T.Ngo ed.): Electrochemical Sensors in Immunological Analysis. PLENUM. 279-291 (1987)
Masuo Aizawa(T.T.Ngo ed.):免疫分析中的电化学传感器。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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知道了