環境シグナル応答細胞の創製

创建对环境信号敏感的细胞

基本信息

  • 批准号:
    11227203
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 99.52万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    1999
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1999 至 2002
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

大腸菌において環境ストレスであるアミノ酸飢餓に応じて発現するRpoSに着目し、rpoSプロモーター下流に緑色蛍光蛋白質(GFP)を組み込んだプラスミドを作成した。このプラスミドで形質転換した大腸菌は、栄養状態等のストレスに応じてGFPを発現し、大腸菌の環境ストレスをモニタリング出来る事を確認した。(相澤)大腸菌由来の多剤耐性に関与するmar遺伝子を用いて、環境中の疎水性物質を検出、および定量する可能性について検討を試みた。その結果、MarR変異体を用いたMar-GFPシステムにおいて変異型MarRが特に芳香族化合物により失活し易いことを確認し、このことを利用して環境由来の芳香族化合物を検出、定量できるシステムを構築した。(青野)無核細胞の放出を青定色により検出するスクリーニング系により、大腸菌を球菌化させて死に至らしめる新規S-benzylisothiourea誘導体を見いだした。この化合物はペニシリン結合タンパク質2には結合せず、これ以外の桿菌形態形成タンパク質に作用すると思われた。作用標的の同定のため、耐性変異株を分離した。(和地)高圧下に適応した深海微生物並びに大気圧下に適応した大腸菌を材料にして、加圧に応答して発現する遺伝子を検索し、同遺伝子のプロモータ領域の下流に、蛍光タンパク質GFPをコードする遺伝子を導入した。その結果、30MPa〜70MPaの圧力を関知して発光する細胞の構築に成功した。(加藤)膜小胞の突起形成に必要な力測定。リポソームにビーズを2個取り込ませ、レーザーツイーザーを用いて張力を加え、その形態応答を可視化・測定した。膜突起の伸長・短縮にかかわらず形態維持に必要な力は〜3pNで一定であった。また、膜突起消失時に一過的に〜5pN発生し、その後は徐々に減衰した。この結果は膜の履歴現象と形態維持に常時力が必要なことを示している。(宝谷)
Coliform bacteria in the environment, such as acid starvation, the development of RpoS, rpoS, downstream green fluorescent protein (GFP), the formation of protein. The presence of GFP in the environment and the presence of E. coli in the environment are confirmed. (Phase) Coliform origin of multi-agent resistance related to the use of bacteria, environmental water substances in the detection, identification and quantification of the possibility of discussion The results showed that MarR was used to identify and quantify aromatic compounds of environmental origin. (Aino) Eukaryotic cells release green color, detection, detection. These compounds have the function of binding to the substance 2 and forming the substance of other bacteria. The target of action is the same, the tolerance is different, the isolation is different. (and) deep sea microorganisms under high pressure and coliform bacteria under high pressure; detection and discovery of genes under high pressure; and introduction of genes under high pressure and GFP. As a result, the pressure of 30MPa ~ 70MPa is related to the success of cell construction. Determination of forces necessary for the formation of membrane vesicles. 2. Use the tension to increase the visibility. Elongation and contraction of membrane are necessary to maintain morphology. When the membrane protrusion disappears, the first ~ 5pN is generated, and the second is reduced. The result is that the membrane phenomenon and the shape are maintained at a constant time. (Treasure Valley)

项目成果

期刊论文数量(74)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Y.Yanagida: "Electrically stimulated induction of hsp70 gene expression in mouse astroglia and fibrobrast cells"J.Biotechnology. 79. 53-61 (2000)
Y.Yanagida:“电刺激诱导小鼠星形胶质细胞和成纤维细胞中 hsp70 基因表达”J.Biotechnology。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
N.Tsukagoshi: "Entry into and release of solvents by Escherichia coli in an organic-aqueous two-liquid phase system and substrat speciticity of the AcrAB-ToIC solvent-extracting pump"J.Bacteriol.. 182. 4803-4810 (2000)
N.Tsukagoshi:“有机-水两相系统中大肠杆菌的溶剂进入和释放以及 AcrAB-ToIC 溶剂提取泵的底物特异性”J.Bacteriol.. 182. 4803-4810 (2000)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
K. Nakasone: "Analysis of cis-elements upstream of the pressure-regulated operon in the deep-sea barophilic bacterium Shewanella violacea strain DSS12"FEMS Microbiol. Lett.. 176. 351-356 (1999)
K. Nakasone:“深海嗜压细菌 Shewanella violacea 菌株 DSS12 中压力调节操纵子上游的顺式元件分析”FEMS Microbiol。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
宝谷紘一: "細胞べん毛 細胞工学別冊 顕微鏡フル活用術イラストレイテッド"秀潤社 (印刷中). (2000)
Koichi Takaratani:“充分利用显微镜的细胞鞭毛细胞工程分离卷插图技术”Shujunsha(出版中)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
M.Yamada: "Pressure-regulation of soluble cytochromes c in a deep-sea piezophilic bacterium, Shewanella violacea"J.Bacteriol. 182. 2945-2952 (2000)
M.Yamada:“深海嗜压细菌 Shewanella violacea 中可溶性细胞色素 c 的压力调节”J.Bacteriol。
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  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
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  • 通讯作者:
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相澤 益男其他文献

Electro-enzymology, coenzyme regeneration
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  • DOI:
  • 发表时间:
    1988
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    中村 厚三;相澤 益男;宮脇 長人
  • 通讯作者:
    宮脇 長人
New developments in construction and functions of organic thin films
有机薄膜结构与功能的新进展
  • DOI:
    10.1016/s1383-7303(96)x8013-x
  • 发表时间:
    1996
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    梶山 千里;相澤 益男
  • 通讯作者:
    相澤 益男

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    11167226
  • 财政年份:
    1999
  • 资助金额:
    $ 99.52万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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    07241103
  • 财政年份:
    1995
  • 资助金额:
    $ 99.52万
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    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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    04204007
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    1992
  • 资助金额:
    $ 99.52万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
生体情報・エネルギ-変換分子材料の設計および機能制御
生物信息/能量转换分子材料的设计与功能控制
  • 批准号:
    03204009
  • 财政年份:
    1991
  • 资助金额:
    $ 99.52万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
生体情報・エネルギ-変換分子材料の設計および機能制御
生物信息/能量转换分子材料的设计与功能控制
  • 批准号:
    02204009
  • 财政年份:
    1990
  • 资助金额:
    $ 99.52万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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生物反应的电化学控制和智能生物反应器系统
  • 批准号:
    01470078
  • 财政年份:
    1990
  • 资助金额:
    $ 99.52万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
生体情報伝達機能の発現と新機能材料の設計
生物信息传递功能表达及新型功能材料设计
  • 批准号:
    01604008
  • 财政年份:
    1989
  • 资助金额:
    $ 99.52万
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    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
生体情報伝達機能の発現機構と新機能材料の設計
生物信息传递功能表达机制及新型功能材料设计
  • 批准号:
    63604008
  • 财政年份:
    1988
  • 资助金额:
    $ 99.52万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
化学増幅を利用した高感度バイオセンサ
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  • 批准号:
    62217008
  • 财政年份:
    1987
  • 资助金额:
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細胞の電気化学的破壊法に関する研究
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  • 批准号:
    60550563
  • 财政年份:
    1985
  • 资助金额:
    $ 99.52万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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