新しいTiプラスミドを用いての植物体内ホルモンの制御

使用新的 Ti 质粒调节植物激素

• 批准号: 62219010
• 负责人: 我彦 広悦
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Akita Prefectural College of Agriculture
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Special Project Research
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 1988
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62219010/

秋田県に存在するクラウンゴールを採取し,その懸濁液を作り選択培地にまいた. 得られた約90種の菌株のうち, 広宿主域を示すものは19種で, これらについてAgrobacteriumに特異的とされる性質を調べた. Biotypeは1, 2, および3であり, Cpine利用能はOctopine型一種で他はすべてNopaline型であった. 各菌株の持つプラスミドの総数は3ないし4で, そのうちTiプラスミドの大きさは約200kbあるいは300kbであった. これらの性質に基づき菌株はポプラから得られたP022, P028, P031, P0201, ナシからはPyTS3, PyTE1, リンゴからはAkE10に代表されるグループに分類できた. 総プラスミドを制限酵素で切断し, 得られたDNA断片について, 既に構造の知られたpTiT37のT-DNAをプローブとしてサザンハイブリダイゼーションを行なった. その結果, 既知のものと同じ大きさのDNA断片および異なる断片にハイブリダイズすることが見出された. さらにこれら異なる断片の大きさもT:プラスミド間で違いが見られた. 全体として植物ホルモン遺伝子を含む領域の構造は保持され, それ以外の部位に違いが見られた. 一つ例外はAkE10であり, ホルモン遺伝子部位も変っていることが示唆された. 次に, 得られた菌株の植物への感染実験を行なった. ペチュニアの茎に菌を植えつけ, 3か月後, ゴール形成を観察した. その結果, P031, P0201, PyTE1, PyTS3では大きなゴールが形成されたのに対し, P022, P028, およびAkE10では小さなゴールしか作らなかった. このような大小のゴール形成, およびホルモンレベルとT-DNAの多様な構造との因果関係を知るためにT-DNAの分離, 改変およびそのクローンを用いての植物の形質転換を行なって行く予定である.

Akita has a suspension that can be used as an alternative culture medium. About 90 strains were identified, 19 of which had host domains, and some of which had specific Agrobacterium properties. Biotype 1, 2, 3, Cpine utilization energy Octopine type Nopaline type. The total number of strains was 3 to 4, and the total number of strains was about 200 kb. The basic strains P022, P028, P031, P0201, PyTS3, PyTE1, AkE10 represent the basic strains P022, P028, P031, P0201, PyTS3, PyTE1, AkE10. The structure of the T-DNA fragment of pTiT37 was determined by the restriction enzyme cleavage. As a result, we know that the DNA fragments of the same species are different from those of the same species. Today, the two sides of the Taiwan Strait are divided into two parts. The structure of the entire plant area including the microbial heritage remains unchanged, but can be seen in other parts of the plant. An exception is AkE10 The infection of the plant by the strain was detected. After 3 months, the formation of the fungus was observed. Results, P031, P0201, PyTE1, PyTS3, P022, P028, AkE10, PyTE1, PyTS3, PyTE1, PyTE2, PyTE3, PyTE1, PyTE3, PyTE1, PyTE2, PyTE3, PyTE1, PyTE3, PyTE1, PyTE2, PyTE1, PyTE2, PyTE3, PyTE1, PyTE1, PyTE2, PyTE3, PyTE1, PyTE2, PyTE1, PyTE2, PyTE1, PyTE1, PyTE T-DNA isolation, transformation and utilization of T-DNA in plant morphological and qualitative transformation are determined by the method of genetic analysis.