シオノギ癌115のin vitroにおけるホルモン抵抗性獲得の機序の研究

盐野木癌115获得激素抵抗的体外机制研究

• 批准号: 62570717
• 负责人: 井坂 茂夫
• 金额: $ 0.45万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62570717/
• 关键词: アンドロゲン依存性シオノギ癌SC115; アンドロゲン非伝存性サブラインCS2; 無血清培養; 染色体分析; ONA定量

(1)細胞の維持継代:SC115及びS2の細胞株は, テキストランチャーコール処理しステロイドホルモンを除去した牛脂児血清〓%含むRPMI16〓O培地に10nMのテストステロンを添加した培地にて継代, 維持, クローニングを行なった. クローニングによって得られたサブリローンは液体窒素中に保存してある.(2)細胞増殖:i)テストステロン依存性を示すSC115細胞はMEM培地とHAM培地を1:1に混合した無血清培地では次第に死滅していくが, 10nmのテストステロンを加えることにより増殖が可能であった. テストステロン非依存性のCS2細胞はテストステロンの有無にかかわらず増殖可能であった. 上皮成長因子やインシュリンはSC115細胞やCS2細胞の増殖を促進させなかった. ii)SC115とCS2を混在させて培養すると, テストステロンを含まない無血清培地での培養にもかかわらずSC115が死滅することなく増殖していることが顕微鏡所見よりわかった.(3)染色体分析:i)SC115, CS2のマウスにおける染色体数はそれぞれ40, 72であったが, 細胞株における染色体数はそれぞれ39, 69を示し, in vivoからin vitroへの条件の変化により染色体の変化がおきていることがわかった. ii)(2)のii)において染色体分析を行った結果, SC115細胞の増殖はCS2細胞によって促進されていることがわかった.(4)DNA定量:i)プロピディウムイオダイド染色により, フローサイトメトリーでDNAを定量したところSC115細胞はマウス正常細胞とほぼ同じDNA量を示し, CS2細胞はほぼそれの倍の量であった. ii)SC115細胞とCS2細胞を混在させたときのDNA量測定からも染色体分析で得られた結果と同様にCS2細胞によるSC115細胞の増殖が促されていることがわかった.

(1)Maintenance of cells: SC115 and S2 cell lines were cultured in vitro, maintained, and treated to remove lipid from bovine serum containing RPMI16 and 10nM. In the middle of the night, the sun rises and the moon rises. (2)Cell proliferation:i) temperature dependence: SC115 cells MEM culture: HAM culture: 1:1 mixture: serum-free culture: second death: 10 nm temperature dependence: 1:1 mixture: 10nm temperature dependence: 1:1 mixture: 1:1 mixture: 1 mixture: CS2 cells are independent of each other. Epithelial growth factor promotes proliferation of SC115 and CS2 cells. ii)SC115 and CS2 are mixed in culture, and the culture medium contains serum-free culture medium, and SC115 is killed. (3)Chromosome analysis:i) SC115, CS2 chromosome number is 40, 72, cell line chromosome number is 39, 69, in vivo, in vitro, conditional chromosome transformation. ii)(2) and ii) Chromosome analysis results, SC115 cell proliferation and CS2 cell proliferation promotion. (4)DNA quantification:i) DNA quantification in SC115 cells and CS2 cells. ii) DNA quantitative analysis of SC115 cells and CS2 cells was performed in the same way as that of CS2 cells.