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重金属特異反応生物の検素・育成と育成生物の環境適合性

重金属特异性反应生物的检测与培养及培养生物的环境相容性

基本信息

批准号：
62602010
负责人：
茅野充男
金额：
$ 7.3万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究はバイオテクノロジーで培われた技術を応用し, 重金属を多く蓄積したり排除したりする重金属特異反応生物を探索し, その育成をはかり, 人間-環境系における重金属の循環を合理的なものにしようとするものである.本研究は対象となる生物種によって, 微生物, 植物, ヒト・動物グループの3グループにわけられる.1)微生物:重金属汚染土壌や排水中より亜鉛耐性菌を17株探索分離し, アガロースゲル電気泳動によりプラスミドpZnC8, pZnC17を検索した. これらのプロスミドを用いたE.coli C600-1株を形質転換すると頻度10^4で亜鉛耐性菌が出現した. これよりpZnC8およびpZnC17にY8およびY17の亜鉛耐性因子がコードされていることがしめされた. また, 大腸菌細胞内への水銀の取り込みを促進する因子をコードしているプラスミドmerTを用いてプラスミド脱落率の変動を検討する実験を実施した. その結果, プラスミドの脱落率は0.1〜3.4%であり, ブイヨン培地より汚泥中で脱落率が低い値を示した.2)植物:タバコとイネの培養細胞にCdストレスをかけ, 細胞のCd耐性の限界を知ると共に, 耐性株誘導に関する基礎的知見を得ようとした. その結果, タバコにおいては培地Cd濃度が10^<-2>mMを越えると通常の細胞は生育が顕著に不良となり, 3×10^<-1>mMで生育は停止した. ところが高濃度Cdに耐性の細胞株が得られ, それは0.3mMのCdに耐性であった. 耐性株にはメタロチオネイン様と類似の物質の集積が見られた.3)ヒトおよび動物:メタロチオインを動物体内で効率よく検出する手法を開発し, それをもとに重金属耐性の昆虫コカゲロウ中の重金属結合タンパクを分離定量した. その結果この昆虫ではCu.Cd.Zn各々と結合するタンパクは互いに異なっていた. 経気道的に吸収されるCdの毒性が経口的に吸収されるものより高い事についても検討し, 経気道的に吸収された場合, 体内におけるメタロチオネイン誘導能が低下することによると推定した.

This study aims to explore the application of culture technology in heavy metal accumulation, elimination and breeding of heavy metal-specific anti-biological agents, and rational heavy metal circulation in human-environment system. This study focused on biological species, microorganisms, plants, animals and plants. 1) Microorganisms: heavy metal contaminated soil and drainage. Seventeen lead resistant bacteria were isolated and identified. E.coli C600-1 strain was transformed morphologically with a frequency of 10^4 and lead resistant bacteria were found only in E.coli C600-1. PZnC8 and PZnC17, Y8 and Y17 lead resistance factors are discussed. In addition, the factors that promote the uptake of mercury in Escherichia coli cells are discussed in detail. The results showed that the shedding rate of Cd in cultured cells was 0.1 ~ 3.4%, and the shedding rate in sludge was low. 2) Plants: Cd in cultured cells, Cd tolerance limit of cells, basic knowledge about induction of tolerant plants. As a result, the concentration of Cd in the culture medium is 10^<-2>mM, and the normal cell fertility is not good, 3×10^<-1>mM, and the fertility is not stopped. Cell lines with high Cd tolerance were found to be resistant to Cd at 0.3 mM. The accumulation of similar substances in resistant plants was found in the following ways: in animals, the detection rate was found in the development of heavy metal-resistant insects, and the separation and quantification of heavy metal-binding substances in the development of heavy metal-resistant insects. As a result, the insects were mixed with Cu.Cd.Zn. The toxicity of Cd in the channel is due to the high concentration of Cd in the channel. In the case of the absorption of Cd in the channel, the induced energy of Cd in the body is low.