ストップト・フロー熱測定によるエネルギー変換ATPaseの動力学・熱力学的研究

使用停流量热法进行能量转换 ATP 酶的动力学和热力学研究

• 批准号: 62617005
• 负责人: 児玉 孝雄
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62617005/
• 关键词: ストップトフロー法; カロリメトリー; ミオシンATPasase; 熱力学; 吸熱反応

ATPase反応中間過程の熱力学的特徴と反応機構との相関をつけるために, 筋肉熱産生測定用の小型熱電堆を用いたストップトフロー熱量計による解析を行っているが, 今年度は, 次のような性能改善をはかり, ミオシンによるATP加水分解反応におけるATPの結合から加水分解, PiおよびADPの解離に至る主要な中間過程が熱測定的に分離できた. すなわち, すでに開発していた装置の観測室・混合装置をアルミニュウムブロック2枚構成のハウジングに収め, 空気恒温槽内に静置した水槽に沈めた, このように, 測定系の恒温環境を入れ篭構造にしたことによって, 1mkの微小温度変化が, ばらつき5%以下で測定できるようになった.0°C, PH8.0におけるミオシンサブフラグメント(SF-1)とATPの相互作用では, 装置の不感時間内(10ms)に完了する速い発熱に続いて, 速い吸熱が見られる. 今回の改良によって, 種々の異なる温度での測定も可能となったので, 25°Cおよび15°Cでの測定を行った. 25°C, PH8.0では, ATPの加水分解が速い(>200s^<-1>)ために, ATPの結合と加水分解は不感時間内に完了してしまう, したがって, 反応初期には, 速い発熱のみが見られる. 温度を15°Cに下げると, 反応開始直後の速い発熱の後に, 溶液の流れ停止(flow stop)前ではあるが, 吸熱相が認められるようになる. PHを8.0から7.0に下げると, flow-stop後, およそ40msぐらい持続する吸熱相がみられる. このような吸熱相の温度・PH依存性は, ATP加水分解過程の動力学的特性と良く対応する. すなわち, 温度や, PHが低下した場合, ATP加水分解速度は, 25s^<-1>(PH8.0, 5°C)-55s^<-1>(PH7.0, 15°C)程度まで遅くなる. したがって, 15°C以下のストップフロー熱測定で見られる吸熱相は, ATPの加水分解過程に対応し, 先行する速い大きな発熱は, SF-1へのATPの結合にともなう熱変化に対応すると結論される.

The special anti-mechanical mechanism of ATPase anti-thermal process mechanics is responsible for the analysis of the mechanical properties of small-scale thermal power packs. This year, the performance of secondary thermal power plants has been improved. This year, the performance of secondary equipment has been improved. This year, the performance of secondary equipment has been improved. This year, the performance of secondary equipment has been improved. This year, the performance of secondary equipment has been improved, and the combination of ATP and water decomposition has been combined with ATP. Pi is responsible for the release of ADP quarantines to those that have been tested by the main process test. In the test room, the mixing device is installed in the test room, and the temperature in the air thermostat trough is fixed in the air temperature tank. The water tank is installed in the thermostat tank, and the temperature is measured. The constant temperature environment is installed in the thermostat, and the temperature is changed in the temperature field. The 1mk temperature is very small. When the temperature is less than 5%, the temperature is very high. 0 °C, the PH8.0 temperature is very high, the temperature is very high (SF-1) and the ATP interaction is very sensitive. The device (10ms) has completed the rapid temperature response and the absorption temperature. This time, it is possible to improve the temperature measurement system of this kind of temperature sensor, 25 °C temperature range and 15 °C temperature range. 25 °C, PH8.0 temperature, ATP plus water decomposition speed (& gt; 200s ^ & lt;-1>) temperature, ATP combined with water decomposition temperature does not affect the temperature, the temperature response, the initial temperature response, the speed response is very high. The temperature is 15 °C and the temperature is 15 °C. after the start, the solution flow stops (flow stop), and the absorption phase changes slightly. PH 8.0

项目成果

児玉孝雄, 深田はるみ: 蛋白質核酸酵素. 33. (1988)

Takao Kodama，Harumi Fukada：蛋白质核酸酶 33。（1988）

米谷快男児, 児玉孝雄: 蛋白質核酸酵素. 33. (1988)

Yoshioji Yonetani，Takao Kodama：蛋白质核酸酶。33。（1988）

T.KODAMA,K.KOMETANI: J.Biol.chem.

T.KODAMA，K.KOMETANI：J.Biol.chem。

児玉孝雄;米谷快男児: 生物物理. 27. 59-62 (1987)

Takao Kodama；Yoshioji Yonetani：生物物理学。27. 59-62 (1987)

児玉孝雄: 熱測定. 15. 2-9 (1988)

Takao Kodama：温度测量。15. 2-9 (1988)