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ジャガイモシスト線虫のふ化促進物質の単離・構造決定

马铃薯胞囊线虫孵化启动子的分离及结构测定

基本信息

批准号：
63540417
负责人：
福沢晃夫
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

過年度までに得られた知見より、ジャガイモシスト線虫のふ化促進物質は、極めて不安定であることが明らかとなっている。しかしジャガイモ根券滲出液は、水溶液の状態で比較的安定であることから、水和が安定化に寄与していることは判るものの、その不安定性の真の原因は未だ不明である。ふ化活性物質の分離・精製に当っては、多段階の濃縮乾固を繰り返すため、出来るだけ早く原因を見い出す必要がある。そこで、今年度は、保存中の失活を防止するため液体窒素冷却容器中、-196℃にてサンプルを投入、活性低下があるかどうか調べた。この結果氷結状態および乾燥状態において、6ヶ月間ほぼ保存可能であることが分かった。ただし、濃縮に当っては30℃以下で操作しても失活であり注意を要した。今年度の原料として、トマト生根を用いた。前年度までトマト乾根を用いたものの、風乾、4ヶ月間室内保存後の活性値は変動が大きいためである。そこで原料入手先を札幌市福移、廃熱利用園芸団地に変更し、冬期(12月)に2トンの生トマト根を入手した。室内(0℃)に保存し水抽出を5℃以下で行った。濾過後活性物質をアンバーライトXAD-2に吸着、アセトン脱着、濃縮を30℃以下で行い、粗抽出物を10kg当り乾固状態で3g得た。活性値は10^<-4〜-5>g/mである。このものを-196℃で保存し失活を除いだ。この一部を用い、アンバーライトXAD-2カラムクロマト、次いでセファデックスG-10カラムクロマトに付し、純化した。活性分画は、2ヶ所に表われ、活性値は10^6g/mまで上昇した。なお活性値は冬期のため一桁程低下していると考えられる。現在大量抽出を行い、粗抽出物として蓄積している。すでに前年度において活性値を10^9g/〓まで上昇させているので、その手順に沿い、今後大量の処理、分離・精精を行う。また、極低温保存中のサンプルについて、数ヶ月毎に活性試験を行い、定量的に失活原因を求明しながら単離を行う。

In the past year, we have found that the chemical promotion substances of thread insects are extremely unstable. The reason for the instability of the exudate is unknown. The separation and purification of chemical active substances are necessary for the preparation of multi-stage concentrated solids. This year, in the preservation of inactivation prevention, liquid nitrogen cooling container,-196℃, low activity, regulation The result is that the state of the knot is too dry, and the preservation is possible for 6 months. When the temperature is below 30 ° C, it is necessary to deactivate it. This year's raw materials are used. The activity value of the dried root in the previous year changed greatly after being air-dried and stored in the room for 4 months Starting with raw materials, Sapporo City is the first place to move, heat utilization garden, and winter (December) is the second place to start. Store indoors (0℃) and pump out water below 5℃. After filtration, the active substance is adsorbed, desorbed, concentrated and dried at 30℃ or below, and the crude extract is 10kg or 3 g. Activity value 10^<-4 ￣-5>g/m. The temperature of the solution is-196℃ and the solution is inactivated. The first part of this article is about the use of XAD-2, G-10 and purification. The activity value of the active component is 10^6 g/m, and the activity value is 10^6 g/m. The activity is low in winter. A large amount of crude extract is now extracted and accumulated. In the past year, the activity value was 10^9g/kg, and the process was carried out in the future. In addition, in the process of cryopreservation, the activity test is carried out every month, and the causes of inactivation are quantitatively determined.