ニワトリオルニチントランスカルバミラーゼ遺伝子のクローニング

鸡鸟氨酸转氨甲酰酶基因的克隆

• 批准号: 63560260
• 负责人: 辻 荘一
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63560260/
• 关键词: ニワトリ; 腎臓オルニチントランスカルバミラーゼ; mRNA; ノーザンブロッティング; サザンブロッティング; mRNAのヘテロジネイティー

ニワトリは尿酸合成動物で、尿酸の形で窒素を排泄し、尿素サイクルは不要にもかかわらず、その一酵素、Ornithine transcarbamylase(OTC)が腎臓に検出されるニワトリが存在する。この系統のニワトリのOTC活性は酵素誘導現象や調節遺伝子の変異、あるいは構造遺伝子の変異など多彩な遺伝的な変異を含んでいる。本研究はニワトリのOTCの遺伝子制御機構を解明する研究の一環として行ったものである。ラットの肝臓のOTCのcDNAを入手し、これをプローブした。OTC活性を有するWL-B系ニワトリと活性の殆どないBPR種ニワトリの腎臓からmRNAを抽出し、プローブと反応させた。ラットの肝臓ではただ一種のOTCのmRNAが検出されるのに対し、WL-B系ニワトリの腎臓では明確に2種のmRNAが存在した。その成因については今後の研究に持たねばならないが、ラットのOTCの遺伝子とは明らかに異なっていることが示された。今までに、ヒトはじめ多くの動物のOTCの遺伝子について様々な研究が行われているが、この様な事例は知られていない。他方、OTC活性が殆ど認められないBPR種ではWL-B系のものより大きな、ただ一種のmRNAが検出された。このことから、ニワトリのOTC遺伝子では品種間でもかなり異なっており、OTCの遺伝子制御機構は構造遺伝子の変異も含めて極めて多様であることが推定された。このmRNAを用いてcDNAの合成も行った。次いで、ニワトリとラットから核DNAを抽出し、このDNAを各種制限酵素で切断した。これをサザン・ブロッティング法により検出した。その結果、ニワトリのゲノムにもラットのOTCのcDNAと反応する塩基配列が存在することが明らかになった。また、その制限酵素の複数の断片のサイズはラットのそれとはかなり異なっており、染色体の遺伝子の構造もラットとはかなり異なっているものと推定された。この研究によって、核DNAにも腎臓のmRNAにもラットOTC遺伝子と相同な塩基配列のある遺伝子が見いだされ、これらを用いてクローニングが可能なことが明らかにされた。また、ニワトリの遺伝子の特殊性も明らかにされた。

Uric acid synthetic animal, uric acid asphyxiant excretion, urea asphyxiate, monoenzyme, Ornithine transcarbamylase (OTC) enzyme, uric acid, asphyxia, uric acid, asphyxiant, uric acid, asphyxiate, uric acid, uric acid In the system, the activity of OTC enzymes is very important, such as the production of a variety of colourful colors in the system. The purpose of this study is to verify that the sub-system of the OTC system is responsible for the study of the system. Let's get started with OTC cDNA and get started with it. The activity of OTC is similar to that of WL-B, BPR, mRNA, mRNA, and so on. An OTC mRNA is used to verify that there is an error in the mRNA. The WL-B system is used to verify that there is an error in the system. The cause of formation, the cause of formation, the cause of formation, Today, we are going to tell you that there are many things to do, and that you know that there are many things to do with OTC. The other side, OTC activity is out of order. BPR. WL-B is a kind of mRNA that can be used to make products. The equipment and equipment of the OTC sub-system and the sub-system of the OTC sub-system are designed to contain positive and negative information on the presumption of each other. The mRNA synthesizes the rows with the cDNA. The enzyme was cut off in the following steps: nuclear DNA extraction and DNA extraction. I don't know what to do. I don't know what's going on. The results show that there is an error in the base column of OTC cDNA. The restriction enzyme, the complex number, the fragment, the fragment, the fragment. In the study, the nuclear DNA, the mRNA, the OTC, the same, the same. Please tell me that the particularity of the child is very clear.

项目成果

辻荘一、千原昇: 日本畜産学会報. 59. 180-182 (1988)

Soichi Tsuji，Noboru Chihara：日本动物科学学会公报 59. 180-182 (1988)。

辻荘一、松中昭一、新家龍 編: "新農学シリーズ バイオテクノロジー" 朝倉書店, 88-96 (1988)

辻宗一、松中翔一、新江龙编：《新农业科学系列·生物技术》朝仓书店，88-96（1988）

TSUJI SOICHI: Proceedings XVIII World's Poultry Congress. 529-530 (1988)

Tsuji Soichi：第十八届世界家禽大会论文集。