病原性発現機序へのIgAプロテアーゼの関与の解明ー粘膜局所免疫の攻撃因子かー

阐明IgA蛋白酶参与致病性表达机制——它是粘膜局部免疫的攻击因素吗？

• 批准号: 63570319
• 负责人: 藤山 佳秀
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Shiga University of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63570319/
• 关键词: IgAプロテアーゼ; 腸内細菌; 菌体凝集抗体; 分泌型IgA

Clostridial IgA proteaseの精製は、Clostridium ramosum M.O.-6株の培養上清5リットルを材料に、0.45飽和硫酸アンモニウムによる塩析抽出、Q-Sepharoseイオン交換クロマトグラフィー、Cellulofine GSL 2000ゲル濾過、FPLCシステムMore Qカラムにより行なった。得られた標品は、SDS-polyacrylamide gel electrophoresis上、分子量10,500の単一bandであり、pIは4.57であった。腸分泌液中分泌型IgA(sIgA)は、9例の小腸還流液および10例のポリエチレングリコールによる腸管(大腸)洗液より、抗α鎖結合Sepharose-4Bにてtotal sIgAを、Jacalin lectin結合Sepharoseー4BにてsIgAl(IgAlサブクラス)を精製した。これらの精製腸管分泌液中sIgAについて、Bacteroides vulgatus、B.fragilisおよびClostridium ramosumに対する菌体凝集抗体活性を検討した。その結果、10例中1例の大腸液より精製したsIgAおよびsIgAlにB.vulgatusに対する菌体凝集抗体活性が、また9例中5例の小腸液より精製したsIgAlにC.ramosumに対する菌体凝集抗体活性が見出された。現在、これらの菌体凝集抗体活性のみられた腸管分泌液中sIgAを選択して、対応細菌に対する凝集抗体価に及ぼす精製Clostridial IgA proteaseの作用を検討中である。未だpreliminaryではあるが、IgA proteaseは抗体活性そのものは抑えないが、凝集抗体としての活性を抑制することを示唆する結果を得ている。この検討を進める上での問題点は、小腸還流液や大腸洗液中のsIgAの大半がdogradationを受けていて、高力価の凝集抗体価を有するsIgAを得難いことであり、今後、比較的にintactに保たれている腸管粘液からのsIgAの分離により結論を出したい。これまでに得た結果については、平成元年4月に開催の第36回体液蛋白会議(開催地ロンドン)で成果を公表の予定である。

The supernatants of Clostridial IgA protease, Clostridium ramosum M.O.-6, More Q and sulfuric acid were isolated from 5%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 0.45%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, 5%, On SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, the molecular weight is 10500, and the molecular weight is 4.57, respectively. The secreted IgA (sIgA) in the secretion was detected in 9 cases, and the reflux in 9 cases was detected in 10 cases. The anti-alpha antibody was combined with Sepharose-4B total sIgA, and Jacalin lectin with Sepharose-4B sIgAl (IgAl antigens). SIgA antigens, Bacteroides vulgatus, B.fragilis antigens in the secretion of semen tube were detected by Clostridium ramosum agglutination antibody activity. The results showed that 1 out of 10 cases showed the activity of bacterial agglutination antibody in the semen of sIgA liquid, the activity of bacterial agglutination antibody was detected in 5 of 9 cases, and the activity of bacterial agglutination antibody was not detected in 5 of 9 cases. The activity of bacterial agglutination antibody was detected in 5 of 9 cases. The activity of bacterial agglutination antibody was detected in 5 of 9 cases. Now, the sIgA agglutination antibody activity of bacteria is selected in the secretion of bacteria, bacteria, agglutination antibody, and Clostridial IgA protease in the secretion of bacteria. The results of preliminary antibody inhibition, IgA protease antibody activity inhibition, agglutination antibody inhibition and agglutination test showed that the results were negative. In the final analysis, most of the sIgA in the lotion is affected, and the high-strength agglutination antibody is sensitive to sIgA. In the future, the results of the intact protection test show that the mucus of the tube is sensitive to the concentration of sIgA. The results of the study were successful, and the results of the 36th humoral protein meeting (to be held in April) are scheduled in the public table.