Birbeck顆粒モノクロナール抗体によるランゲルハンス細胞の紫外線傷害の検討

Birbeck颗粒单克隆抗体检测紫外线对朗格汉斯细胞的损伤

• 批准号: 63570467
• 负责人: 堀尾 武
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63570467/
• 关键词: ランゲルハウス細胞; 紫外線; モノクロナール抗体; Birbeck顆粒

(目的)紫外線による表皮ランゲルハンス細胞の障害を、細胞膜抗原および細胞質内Birbeck顆粒に対するモノクロナール抗体を用いて比較検討した。(方法)(1)細胞膜マーカーとしては、市販のOKT_6モノクロナール抗体を使用した。(2)抗Birbeck顆粒モノクロナール抗体は(Lag)は、Lag産生ハイブリドーマ株をBALB/cマウスの腹腔に接種し、腹水より硫安沈澱法ならびにSepharoseカラムで精製した。(3)正常ヒトの上腕皮膚にSunlampを用いて中波長紫外線(UVB)の180mJ/cm^2および270J/cm^2を照射し、1、4、10、15日後に照射皮膚を生検した。(4)採取皮膚をEDTA溶液に浸漬して、表皮と真皮を分離し表皮シートを作製した。(5)RITC標識抗OKT_6抗体、FITC標識抗Birbeck顆粒抗体(Lag抗体)にて表皮シート中のランゲルハンス細胞を免疫染色し、蛍光顆粒鏡下で単位面積あたりのランゲルハンス細胞の数を算定した。(結果)紫外線照射1日後には、OKT_6陽性細胞、Lag陽性細胞ともに照射前の50%(180mJ/cm^2照射)〜30%(270mJ/cm^2照射)に減少し、4日後にはそれぞれ30%〜10%まで減少した。10日後には回復傾向を示し、80%(180mJ/cm^2)、30%(270mJ/cm^2)を示した。180mJ/cm^2照射皮膚では15日後にほぼ照射前の状態となったが、270mJ/cm^2照射では、50〜60%の状態であった。DKT_6陽性細胞とLag陽性細胞数の間には有意の差違が認められなかった。(今後の計画)8-methoxypsoralen塗布後に長波長紫外線(UVA)を照射してPUVA処置を行い、UVB単独照射の結果と比較検討したい。

(Purpose) Ultraviolet rays are used to damage epidermal cells and damage cell membrane antigens. Intracytoplasmic Birbeck granules are used to compare antibodies against Birbeck granules. (Method) (1) Cell membrane membrane markers and commercially available OKT_6 モノクロナール antibody were used. (2) Anti-Birbeck particle モノクロナール antibody (Lag), Lag-producing ハイブリドーマBA LB/c マウスのabdominal inoculationし, ascites sulfide precipitation methodならびにSepharoseカラムでrefinedした. (3) Normal upper wrist skin should be irradiated with medium-wavelength ultraviolet (UVB) 180mJ/cm^2 and 270J/cm^2 using a Sunlamp, and the skin should be irradiated 1, 4, 10, and 15 days later. (4) The skin is immersed in EDTA solution, and the epidermis and dermis are separated and the epidermis is prepared. (5) RITC-labeled anti-OKT_6 antibody, FITC-labeled anti-Birbeck granule antibody (Lag antibody) and epidermis The immunostaining of Nakanobuchi cells was performed, and the area of ​​でたりのランゲルハンス cells was calculated under the microscope. (Result) 50% of OKT_6-positive cells and Lag-positive cells 1 day after ultraviolet irradiation and 50% of cells before irradiation (180mJ/cm ^2 irradiation)~30% (270mJ/cm^2 irradiation) can be reduced, and after 4 days, it can be reduced by 30%~10%. After 10 days, the recovery tendency is 80% (180mJ/cm^2) and 30% (270mJ/cm^2). 180mJ/cm^2 can be used to irradiate the skin after 15 days, the condition before irradiation can be used, 270mJ/cm^2 can be used to irradiate the skin, and the condition of 50~60% can be used. The difference between the number of DKT_6 positive cells and the number of Lag positive cells is determined by the difference between them. (Future plan) Comparison of the results of long-wavelength ultraviolet (UVA) irradiation after 8-methoxypsoralen coating, PUVA treatment, and UVB irradiation alone.

项目成果

Fujita.M.;et al.: Proceedings of the Japanesse Society for Investigative Dermatology. 12. 36-37 (1988)

Fujita.M.；et al.：日本皮肤病研究学会论文集。