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鶏胚卵黄嚢膜の組織培養系における遺伝子発現

鸡胚卵黄囊膜组织培养体系中的基因表达

基本信息

批准号：
01560301
负责人：
杉元康志
金额：
--
依托单位：
Seinan Jo Gakuin University Junior College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

鶏胚の発生分化における卵黄嚢膜の生理的役割を明らかにする目的でここでの遺伝子発現の解析と細胞初代培養の確立を行った。また培養を確立した後、特異的に発現する遺伝子の探索やホルモン・薬剤処理が遺伝子発現にどの様な影響を与えるかを調べた。卵黄嚢膜は発生初期と後期では翻訳産物にかなりの相違があることが分かり、αーフェトプロテイン(AFP)とアルブミンとのスイッチは12日目に観察された。またアルドラ-ゼは8日目に筋型から肝型に転換した。一方、発生中の卵黄嚢に検出されるオボアルブミンはde novo合成ではなく卵白に由来することを確かめた。卵黄嚢膜のタンパク分解酵素活性が見かけ上非常に低いのはこのように卵白が卵黄嚢に移行するため、オボムコイドなどのプロテア-ゼインヒビタ-によるものであった。これらを除くとトリプシン様、キモトリプシン様の酵素活性が顕著に認められるようになり、その中のキモトリプシン型プロテア-ゼを精製し、酵素化学的性質を明らかにした。卵黄嚢膜での遺伝子発現をいくつかのプロ-ブで見たところAFP、アルドラ-ゼ遺伝子以外にはCーmycやコラ-ゲン遺伝子の発現が見られた。また、抗体を使った実験によって上皮細胞成長因子やインシュリン様成長因子が認められた。このことにより卵黄嚢膜は細胞増殖機構や分化の問題を研究する上で適当であると思われる。卵黄嚢膜より細胞培養を試み、それを確立することが出来た。5ー10%FCSを添加しなければならなかったが、卵白を少量加えるとFCS量は減少した。またインシュリンやデキサメサゾンを加えると増殖が促進された。現在、これらによって発現が促進される遺伝子の検索を行っている。

The physiological division of yolk membrane during embryo development and differentiation was studied for the purpose of analysis of embryo development and establishment of primary cell culture. After the establishment of the culture, the discovery of the specific gene, the treatment of the gene, the influence of the gene on the development of the gene, and the regulation of the gene. In the early and late stages of egg yolk membrane development, the products of egg yolk membrane inversion were observed on the 12th day. 8 days ago, the number of people who died in the accident was reduced to 1,000. The egg yolk in the development process is very clear. The egg yolk is very clear. The enzyme activity of yolk membrane is very low. The activity of yolk membrane is very low. The activity of yolk membrane is very low. The enzyme activity of the enzyme is determined by the chemical properties of the enzyme, and the enzyme activity is determined by the chemical properties of the enzyme. In addition to the egg yolk membrane, the development of egg yolk is also observed. Antibodies are used to detect epithelial growth factors. The study on the growth mechanism and differentiation of vitelline membrane The egg yolk membrane was cultured in vitro. 5. Add 10% FCS, add a small amount of protein, and decrease the amount of FCS. The first step is to promote the development of the enterprise. Now, the development of new technologies is promoting the development of new technologies.