权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ヒト・肝セリン脱水酵素及びその遺伝子の構造と調節機構に関する研究

人肝丝氨酸脱水酶及其基因的结构和调控机制研究

基本信息

批准号：
01570126
负责人：
小川宏文
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Toyama Medical and Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

セリン脱水酵素は微生物から高等生物に至るまで広く存在するが、哺乳動物では、〓歯類の肝臓で最も活性が高い。種々の実験から、ラットの本酵素は糖新生に関与する酵素とされている。しかし、ヒト肝では活性がラットの1/10以下であることや、材料の入手が困難なことから、酵素化学的研究は全くなされないない。そこで本研究では、遺伝子組換え技術により、ヒト酵素の構造を解明することを第一目標とした。既に得られているラット肝セリン脱水酵素のcDNAをプロ-ブにして、市販のヒト肝cDNAライブラリイをスクリ-ニングした。陽性クロ-ンは5,000個に1つの割で出現したので、その内の15個を精製し解析した。塩基配列の決定から、328のアミノ酸をコ-ドするオ-プン・リ-ディング・フレ-ムが見出せた。その最小分子量は34,615であった。このcDNAを試験管内で転写し、その産物をさらに兎レティキュロサイト・ライセ-トで翻訳したところ、分子量35,000のポリペプチドが合成され、ラット肝セリン脱水酵素の抗体と反応した。アミノ酸配列はラットのそれと80%以上の相同性があることから、得られたcDNAはヒトセリン脱水酵素に対応することは間違いないと思われる。次に、他種のセリン(又はスレオニン)脱水酵素の一次構造を比較したところ、有意なホモロジ-が存在していた。特に活性中心であることが同定されている補酵素ビタミンB_6結合部位の配列や、グリシンに富むある領域が微生物から高等生物の酵素に共通して見出せた。この事実から、セリン脱水酵素は共通の祖先タンパク質から進化してきたのではないかと想像される。またヒト遺伝子ライブラリイから、このcDNAを用いて多数の陽性クロ-ンを分離した。現在これらを解析中である。

Dehydration enzymes microorganisms have the highest activity from advanced organisms to mammals, mammalian animals, and liver cancers. A variety of enzymes, sugar, enzymes, enzymes and enzymes. The activity of liver, liver and liver. The purpose of this study is to investigate the development of technology, technology, and enzymes in this study. The dehydration enzyme cDNA, the liver, the liver. A total of 5000 sex workers and 15 doctors were found to be in good health. The base allocation column determines whether or not you are going to have a problem, 328, please tell me that it is sour and sour. The minimum molecular weight is 34615. The molecular weight is 35000. The synthesis, the liver dehydration enzyme, the antibody and the antibody. The concentration of cDNA acid was higher than 80%, so that the enzyme dehydration enzyme could be obtained. For the second time, other kinds of dehydration enzymes are used in the production of dehydration enzymes, which are intended to exist in the presence of sodium hydroxide. The active center of the enzyme is the same as that of the B6 combination of enzymes in the field of microbiology. the higher biological enzymes share the same level of enzyme. Both the dehydration enzyme and the dehydration enzyme are common to the ancestors. They are the same as those of the ancestors. Please tell me that you have to use the majority of your sexuality to separate your cDNA from others. We are now in the process of analyzing the situation.