ラット肝セリン脱水酵素mRNAの日内変動の分子機構

大鼠肝脏丝氨酸脱水酶mRNA昼夜波动的分子机制

• 批准号: 02670104
• 负责人: 小川 宏文
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02670104/
• 关键词: セリン脱水酵素; 日内変動; mRNA; クロマチン; DNaseI高感受性; 転写制御; ラット; 遺伝子発現

ラット肝セリン脱水酵素を作るmRNAには日内リズムがあることを発見した。即ちラっトを一定の明暗下で飼育すると,mRNAは夕方最大値を,朝方最小値を示す日内リズムを持ち,その差は20倍に達する。このリズムは、60%ないし91%の高蛋白食でも存在するが、無蛋白食ではmRNAは全く発現されていない。このリズムの発現機構を解明するために、DNase mappingを選んだ。一般に遺伝子はヒストンでおおわれているが、プロモ-タ-やエンハンサ-では、このクロマチン構造がル-スになっていることが多く、遺伝子の発現に密接な関係があるとされている。従ってこの部位はDNaseで切断されやすい。本研究では、mRNAのリズム発生とクロマチン構造を調べた.(方法)7:00と19:00にラットを殺し核を調製した。これに種々の濃度のDNaseを加え部分消化した。DNAを抽出して制限酵素で切断後、サザンブロットを行った。(結果)転写開始点から上流11000塩基には、何ケ所かでDNase高感受性部位があった.そのうち、-3200は発現が高いラットではより感受性であったが、-100は逆に発現の低いラットで感受性であった。また高蛋白食ではmRNAが高いが、無蛋白食では、mRNAが検出できないことは前述の通りであるが、これらのクロマチンを調べたところ、リズムのあるクロマチンで見出されたと同じパタ-ンが得られた。更に、-3800は発現しているクロマチンでより感受性が高かった。(結論)以上の結果からmRNAの周期的発現には,遺伝子の-100と-3200の部位のクロマチン構造の変化が重要と考えられる。また-3800は遺伝子が完全に抑制されるために必要な部位かも知れない。今後、これらの部位に結合する可能性のある転写調節因子の発見に努力する。

Youdaoplaceholder0 liver セリ <s:1> <s:1> dehydrating enzyme を るmRNAに リズムがある リズムがある リズムがある リズムがある とを is found in た within days. Namely ち ラ っ ト を under a certain の tone で rearing す る と, mRNA は evening party maximum numerical を, north Korea on the minimum numerical を す days in リ ズ ム を ち to have, そ の difference about 20 times に は す る. こ の リ ズ ム は, 60% な い し 91% の high-protein food で も exist す る が, no protein food で は mRNA は full く 発 now さ れ て い な い. Youdaoplaceholder1 リズム リズム the issuing institution を explains するために, DNase mappingを choose んだ. General に posthumous son 伝 は ヒ ス ト ン で お お わ れ て い る が, プ ロ モ タ - や エ ン ハ ン サ - で は, こ の ク ロ マ チ ン tectonic が ル - ス に な っ て い る こ と が く, heritage 伝 son の 発 now に contact な masato is が あ る と さ れ て い る. The 従って <s:1> <s:1> site で DNaseで cuts off されやす 従って. This study で は, mRNA の リ ズ ム 発 raw と ク ロ マ チ ン tectonic を adjustable べ た. (methods) at 19:00 7:00 と に ラ ッ ト を kill し nuclear を modulation し た. <s:1> れに kinds of 々 <s:1> concentration <e:1> DNaseを and え partial digestion <s:1> た. After DNAを is extracted from the て restriction enzyme で and cut, the サザ った ブロットを ブロットを goes through った. (results) planning to write start か ら high 11000 salt base に は, any ケ か で DNase high sensitivity position が あ っ た. そ の う ち, - 3200 は 発 now が high い ラ ッ ト で は よ り susceptibility で あ っ た が, - 100 は inverse に 発 is の low い ラ ッ ト で susceptibility で あ っ た. High い ま た high-protein food で は mRNA が が, no protein food で は, mRNA が 検 out で き な い こ と は aforesaid の tong り で あ る が, こ れ ら の ク ロ マ チ ン を adjustable べ た と こ ろ, リ ズ ム の あ る ク ロ マ チ ン で shows さ れ た と with じ パ タ - ン が must ら れ た. There are more に, -3800, and the occurrence of て る る ロ ロ チ でよ でよ でよ が が is highly sensitive が った った. (conclusion) の above results か ら mRNA の cycle 発 now に は, heritage 伝 son の と の - 100-3200 parts の ク ロ マ チ の ン structure - the important と が exam え ら れ る. The また-3800 <s:1> remains the 伝 seed が completely に inhibits the されるために of the necessary な sites and the of the 伝 known れな れな. In the future, the <s:1> れら <s:1> part に will combine the する possibility <s:1> ある転 to write the regulatory factor <e:1> and make に efforts する.

项目成果

Ogawa et al.: "Nutritional Regulation and Tissweーspecific Gene Expression of the Serine Dehydratase in the Rat" J.Biol.Chem.

小川等人：“大鼠丝氨酸脱水酶的营养调节和 Tisswe 特异性基因表达”J.Biol.Chem。