ヒトGMーCSF及びILー3レセプタ-の単離とそのシグナル伝達機構

人GM-CSF和IL-3受体的分离及其信号转导机制

• 批准号: 01570281
• 负责人: 谷山 忠義
• 金额: --
• 依托单位: 国立予防衛生研究所
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01570281/
• 关键词: GM-CSF; ILー3; レセプタ-; モノクロナル抗体

我々はすでにヒト顆粒球ーマクロファ-ジ系細胞に特異的に反応するモノクロナル抗体の作製を報告してきた。本年度は,この抗体と,共同研究者の一人であるウイスタ-研究所のRovera博士が樹立したGMーCSF,ILー3やGーCSFにより増殖するヒト骨髄性白血病細胞株を免疫原としてさらにGMーCSFとILー3依存性細胞増殖を特異的に阻害する3つのモノクロナル抗体と用いてヒトGMーCSFやILー3レセプタ-の解析を行った。これらのモノクロナル抗体はいずれも同程度GMーCSFやILー3に特異的細胞増殖反応を阻害するが,GーCSFやILー2に対する増殖反応には全く影響を与えないことから,GMーCSFやILー3による細胞増殖を特異的に阻害する抗体である。ところが,これらの抗体のいずれもGMーCSFやILー3レセプタ-に作用して,GMーCSFやILー3の代用効果はなかった。つぎに,これらの抗体が^<125>Iで標識したGMーCSFのヒト骨髄性白血病細胞株に対する結合を阻害出来るかどうか検討を行った結果有意に阻害出来ることが明らかになった。これらの事実は,我々が作製したモノクロナル抗体がGMーCSFやILー3レセプタ-そのものか,または,両者のレセプタ-に共通に存在する近接の構造物に対する抗体であることを示唆している。我々はさらに一つのモノクロナル抗体(αMaGー1)が認識する抗原の精製を目指し,抗MaGー1抗体によるイムノアフィニティ-カラムクロマトクロマトグラフィ-によりほぼ均一なバンドにまで精製することが出来た。現在,MaGー1抗原の精製,Nー末端のアミノ酸配列の決定およびSeedらが開発した発現ベクタ-とモノクロナル抗体を用いてクロ-ニングを行っている。

I am reporting on the production and production of antibodies specific to the 々はすでにヒト granule マクロファ-ジ lineage cells. This year's anti-antibodies, co-investigator Dr. Rovera of the research institute, one person Establishment of GM-CSF,IL-3G-CSF and proliferation of bone marrow leukemia cells Strain immunogen としてさらにGMーCSF and ILー3 dependent cell proliferation にspecific blocking する3つのモノクロナルantibodyと UseいてヒトGMーCSFやILー3レセプタ-のanalyticalを行った.これらのモノクロナルantibodyはいずれもThe same degree as GMーCSFやILー3にspecific cell proliferation resistanceをblockerするが,GーCSFやILー2. Antibodies that inhibit the growth of 2 cells and have specific effects on the growth of cells, such as GM CSF and IL-6 antibodies.ところが,これらのantibodiesのいずれもGMーCSFやILー3レセプタ-にeffectして,GMーCSFやILー3のsubstitute effectはなかった.つぎに,これらのantibodyが^<125>IでidentificationしたGMーCSFのヒトbone marrow leukemia cell lineに対する合を hinders it from coming out るかどうか検question を行ったThe result is intentional に hinders it from coming out ることが明らかになった.これらの事実は,I々がproduced したモノクロナルantibodiesがGMーCSFやILー3レセプタ-そのものか, または,両人のレセプタ-に公にexistent するNearly のstructure に対するantibody であることをshows 唆している. I am a 々はさらに一つのモノクロナルantibody(αMaGー1)がknowするantigenのrefinedを目し,anti-MaGー1 antibodyによるイムノアフィニティ-カラムクロマトクロマトグラフィ-によりほぼ uniform なバンドにまでRefined することが出た. Now, the MaGー1 antigen is refined and the N-terminal amino acid sequence is determined and Seedらが开発した発行いてクロ-ニングを行っている.

项目成果

T.taniyama,S.Taki,M.Nagata,K.Yoshizawa,N.hirayama,J.Haimura,T.Uchiyama,G.Wong,G.Rovera: "Monoclonal Antibodies that Specifically Inhibit GMーCSFーand ILー3ーDependent Growth of Human Mohocytic Leukemia Cells" Growth Factors. 1. 263-270 (1989)

T.taniyama、S.Taki、M.Nagata、K.Yoshizawa、N.hirayama、J.Haimura、T.Uchiyama、G.Wong、G.Rovera：“特异性抑制 GM－CSF－和 IL－3 的单克隆抗体-人淋巴细胞白血病细胞的依赖性生长”生长因子。1. 263-270 (1989)