黄疸の発症機序及び治療に関する類洞側、細胆管側各肝細胞膜の物質輸送機構の研究

肝窦和胆小管肝细胞膜物质转运机制与黄疸发病机制及治疗的研究

• 批准号: 01570416
• 负责人: 山本 俊夫
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kinki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01570416/
• 关键词: ビリルビン; 肝細胞膜輸送; スルフォブロモフタレイン; タウロコ-ル酸; 膜流動性; リン脂質; S-アデノシルメチオニン; ESR

細胆管側肝細胞膜vesicles(CMV)へのbilirubin digolucuronide(BOG)摂取については、CMVを用いて、〔^3H〕BDGの摂取を急速ろ過法にて観察した。〔^3H〕BDGはラットに〔^3H〕αALAを投与して胆汁から精製した。KClの濃度勾配下で〔^3H〕BDGの初期摂取は、〔^3H〕BDG濃度を上昇させると飽和した〔Km=75μM、Vmax=0.38nmal/mg蛋白×20s、37℃)。CMVを非標識BDGにて前孵置すると、〔^3H〕BDG摂取は対照の約1.3倍に増加した。BSPは〔^3H〕BDG摂取を競合的に阻害するが、タウロコ-ル酸Naによる阻害は認められなかった。100mM等価のアニオン勾配下での〔^3H〕BDG摂取は、Cl^-にての摂取を100%(平均)とした場合、HCO_3^-244%、SO_4^<2->78%、NO_3^-68%、SCN^-50%であり、HCO_3^<>の勾配下での摂取が極めて高かった。一方標識タウロコ-ル酸Naの摂取はCl^-100%、SO_4^<2->95%、HCO_3^-68%、NO_3^-72%、SON^-51%であり、HCO_3^-存在による特異的上昇はみられなかった。valinomycinの存在下で、K gluconate勾配下での〔^3H〕BDG摂取は、対照の約1.4倍に増加した。以上の結果から、BDGはタウロコ-ル酸Naとは異なり、BSDと共通のCMVのキャリア-によって移送される事、その駆動力としては、膜内外の電位差に加えて、HCO_3^-が何らかの役割を演じている事が明らかとなった。肝細胞膜流動性の観察は類洞側肝細胞膜vesicles(SMV)を用いて、5-doxyl-stearic acidを添加しスピンラベルし、膜流動性をESRにて測定した。S-adenosylmethionine(SAMe)をSMVに添加して変化を観察した。order parameter Sは対照群で0.634±0.003であったがSAMe添加にて0.623±0.003と低下しin vitroに流動性亢進が確認できた。膜リン脂質の測定のためにphosphatidylcholine(PC)他6種を分画測定できるHPLCを開発し、SMVおよびCMVにおいて測定を行い比較した。SMVにおいてはsphingomylinが各々高濃度で、膜のheterogeneityが証明された。今後黄疸時のビリルビン輸送を追究予定である。

Vesicles (CMV) bilirubin digolucuronide (BOG) assay was performed on the membrane of bile duct liver, and CMV was used to detect the cell membrane. (^ 3H) BDG was used to detect the cell membrane by rapid filtration. (^ 3H) BDG (^ 3H) alpha ALA was injected into bile and sperm. The initial concentration of (^ 3H) BDG, the initial temperature of (^ 3H) BDG and the temperature of (Km= 75 μ M, Vmax=0.38nmal/mg protein × 20s, 37 ℃) were matched with Vmax=0.38nmal/mg protein. CMV pre-incubation of non-standard BDG photos, (^ 3H) BDG images are about 1.3 times higher than that of others. BSP (^ 3H) BDG is used to select the combination of blocking agent, acid Na and blocking agent. 100mM, etc., select (^ 3H) BDG, HCO_ 3 ^-244%, SO_ 4 ^ & lt;2->78%, NO_ 3 ^-68%, SCN ^-50% microwave, and HCO_ 3 ^ & lt;>. One party knows that the brand name-acid Na is selected for Cl^-100%, SO_ 4 ^ & lt;2->95%, HCO_ 3 ^-68%, NO_ 3 ^-72%, son ^-51% brand, HCO_ 3 ^-there is a special license for the previous application. When valinomycin exists, K gluconate is matched with (^ 3H) BDG, and the light is about 1.4 times higher than that of normal. The above results are as follows: the results of the above results, BDG, Na, BSD, CMV, dynamic, internal and external potential difference between the film and the film, HCO_ 3 ^-why do you want to use the performance of the cut-off program? The vesicles (SMV) of the membrane of the liver was measured by the method of measuring the membrane fluidity of the liver, the membrane of the liver was measured by adding the membrane fluidity ESR, the membrane fluidity of the liver was measured by adding the membrane fluidity test and the membrane fluidity test. S-adenosylmethionine (SAMe) "SMV" adds a "chemical" to observe the situation. The number of order parameter S photos was 0.634 ±0.003 and the number of SAMe was 0.623 ±0.003. In vitro was found to be high in flow and confirmed to be abnormal. The phosphatidylcholine (PC) is used to determine the temperature of the membrane, and the SMV is used to determine the performance of the HPLC. The SMV temperature is different from that of the sphingomylin, and the film is heterogeneity. From now on, when the jaundice becomes jaundiced, please send it to you for investigation.

项目成果

神戸章,足立幸彦,山本俊夫: "αビリルビン生成におけるアルブミンSH基、NH_2基の意義について" 肝臓. 30. 708 (1989)

Akira Kobe、Yukihiko Adachi、Toshio Yamamoto：“论白蛋白 SH 基团和 NH_2 基团在 α-胆红素产生中的意义” 肝脏。 30. 708 (1989)

(編集)山本俊夫: "消化器セミナ-34特集=黄疸:病態生理の新しい視点" へるす出版, (1989)

（编辑）Toshio Yamamoto：“胃肠研讨会 - 34 专题=黄疸：病理生理学的新视角”健康出版社，（1989）

山本俊夫,足立幸彦,小林宏明: "ビリルビンの類洞側および細胆管側肝細胞膜における輸送機構の研究" 病態生理. (1990)

Toshio Yamamoto、Yukihiko Adachi、Hiroaki Kobayashi：“胆红素在肝窦和胆小管肝细胞膜中转运机制的研究”病理生理学（1990）。

小林宏明,足立幸彦,伊藤正,胡桃良章,庄司実香,上韋硲俊法,山下正己,神戸章,島田昌和,川崎紀彦,大山博正,山本俊夫: "第6回肝代謝研究会報告集(分担執筆)分担題名:分離rat毛細胆管側肝細胞膜(CMV)おけるbilirubin diglucuronide(BDG)の輸送機構の検討" アサヒメディカル, (1990)

小林弘明、安达幸彦、伊藤正、久留美义明、庄司三嘉、上井俊纪、山下雅美、神户彰、岛田正和、川崎纪彦、小山宏正、山本敏夫：《第六届肝脏代谢研究小组报告（撰稿人）》（作者） ) 部分标题：胆红素二葡萄糖苷酸 (BDG) 在离体大鼠胆小管肝细胞膜 (CMV) 中转运机制的研究，”Asahi Medical，(1990)

Y.Adachi,M.Yamashita,T.Nanno and T.Yamamoto.: "Proportion of conjugated bilirubin in bile in relation to hepatic bilirubin VDP-glucuronyltransferase activity" Clinical Biochemistry. 23. (1990)

Y.Adachi、M.Yamashita、T.Nanno 和 T.Yamamoto.：“胆汁中结合胆红素的比例与肝胆红素 VDP-葡萄糖醛酸转移酶活性的关系”临床生物化学。