肝内胆汁うっ滞発症機序並びに治療に関する類洞側細胞管側肝細胞膜の病態生理の研究

肝窦和导管细胞膜的病理生理学研究，探讨肝内胆汁淤积的发病机制和治疗

• 批准号: 63570335
• 负责人: 山本 俊夫
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kinki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63570335/
• 关键词: 肝細胞膜; 類洞側肝細胞膜ベジクル; 細胆管側細胞膜ベジクル; ESR; 膜流動性; 色素膜輸送; Bilirubin diglucuronide; 膜リン脂質組成

胆汁うっ滞の機作を研究する目的でラット肝細胞膜ベジクルを類洞側(SMV)及び細胆管側(CMV)から別々に作成し、各々の1)膜流動性2)リン脂質組成ならびに3)CMVの色素摂取等を検討し、基礎的検索を行い、胆汁うっ滞時との比較を試みた。SMV、CMVの純度の検討はNa^+-K^+ATPaseその他の酵素測定により行った。1)膜流動性:核磁気共鳴装置(FSR)を用い、スピンラベル法でオーダーパラメーターSを観察した。浅部親水部ではSMV0.35、CMV0.40で共にSMVがCMVより流動性は高く、深部親水部でより著明であった。2)膜リン脂質測定:膜リン脂質組成の分析を高速液体クロマトグラフィー(HPLC)を用いて行い、従来の薄層クロマトグラフィーによる方法と比較検討した。CMVはSMVに比べリン脂質の含有量が多く、1.4:1の比率を示した。リン脂質の組成をみるとCMVではSMVに比べスフィンゴミエリンの%が最も異っておりCMV24%SMV9%で、一方レシチンはCMV37%、SMV56%であった。その他の組成は略一致していた。この事はリン脂質中の脂肪酸の不飽和度に差異のある事を示し両膜流動性の差異の一因と考えられた。3)CMVの色素輸送:CMVの色素輸送の基礎的検討のため特に抱合ビリルビンであるBDGを実験室内で標識精製し実験を行った。BDGとCMVを孵置し、CMVへのBDGの輸送を観察する条件を検討した。標識BDGをCMVと孵置し、1分間の37℃と0℃の温度差でCMVのBDG摂取を観察し得る事が判明した。種々の条件下で実験を行いNa非依存性Cl依存性を認め、preloading効果があり、BSPにより阻害され、タウロコール酸で阻害されない事を認めた。これらによりタウロコール酸のそれと異りBSPと共通するCMVキャリヤTの存在が示唆された。以上の1〜3)の基礎的所見を胆汁うっ滞動物の所見と目下比較検討中である。

Objective: To study the mechanism of bile stasis. To investigate the mechanism of bile stasis, we studied the membrane structure of hepatocytes, SMV and CMV, respectively. 1) Membrane fluidity. 2) Lipid composition. 3) Pigment of CMV. The purity of SMV and CMV was determined by Na^+-K^+ATPase and other enzymes. 1)Membrane Fluidity: Nuclear Magnetic Resonance (FSR) Measurement SMV 0.35, CMV 0.40 in shallow hydrophilic part, CMV fluidity high in deep hydrophilic part, light in deep hydrophilic part 2)Determination of Membrane Lipid: Analysis of Membrane Lipid Composition by High Speed Liquid Chromatography (HPLC) CMV SMV has a high lipid content and a 1.4:1 ratio. The composition of lipids in CMV is different from that in SMV by 24% SMV by 9% and by 37% SMV by 56%. The composition of the company is slightly consistent. The difference in unsaturated fatty acids in lipids is due to the difference in membrane fluidity. 3)CMV Pigment Transport: The basic study of CMV pigment transport is to carry out the identification and refinement of BDG in laboratory. BDG incubation, CMV and BDG transport conditions are discussed. The temperature difference between 37℃ and 0℃ during incubation of CMV and BDG was detected. Under these conditions, Na independent Cl dependence is recognized, preloading effect is recognized, and BSP is recognized. The BSP is the only way to communicate with CMV. The basic findings of 1 ~ 3) above are compared with those of animals.

项目成果

胡桃良章、足立幸彦、伊藤正、小林宏明、山下正己、上硲俊法、神戸章、山本俊夫: 日本消化器病学会誌. Vol86. 522 (1989)

Yoshiaki Kurumi、Yukihiko Adachi、Tadashi Ito、Hiroaki Kobayashi、Masami Yamashita、Toshihiro Kamisuke、Akira Kobe、Toshio Yamamoto：日本胃肠病学会杂志第 522 卷（1989 年）。

Y.Adachi,;H.Inufusa,;M.Yamashita,;A.Kambe,;K.Yamazaki,;Y.Sawada,;T.Yamamoto,: Clinical Chemistry. 34巻. 385-388 (1988)

Y.Adachi,;H.Inufusa,;M.Yamashita,;A.Kambe,;K.Yamazaki,;Y.Sawada,;T.Yamamoto,：临床化学第 34 卷。 385-388 (1988)

Y.Adachi,;A.Kambe,;M.Yamashita,;H.Inufusa,;S.Nagase,;T.Yamamoto,: J.Hepatol. 7巻. 224-228 (1988)

Y.Adachi,;A.Kambe,;M.Yamashita,;H.Inufusa,;S.Nagase,;T.Yamamoto,：J.Hepatol。 7. 224-228 (1988)

M.Yamashita,;Y.Adachi,;A.Kambe,;T.Nanno,;S.Nagase,;T.Yamamoto,: J.Lab.Clin.Med. 122巻. 443-449 (1988)

M.Yamashita,;Y.Adachi,;A.Kambe,;T.Nanno,;S.Nagase,;T.Yamamoto,: J.Lab.Clin.Med. 122. 443-449 (1988)