再灌流時におけるラジカル発生の直接証明

直接演示再灌注过程中自由基的产生

• 批准号: 01570504
• 负责人: 中澤 博江
• 金额: $ 0.32万
• 依托单位: Tokai University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 1990
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01570504/
• 关键词: フリ-ラジカル; 再灌流; ESR; 再潅流

再潅流障害の起因物質として酸素由来のラジカルが注目されている。 しかし、ラジカルは著しく寿命が短いために化学的に捕促する事が極めて困難である。 本研究の目的は心臓そのものからの再潅流時のラジカル発生を直接測定することである。 平成1年度でESRスピントラップ法を用いて再潅流直後にラット潅流心から酸素由来のラジカルが発生することを示すことが出来た。 本年度は下記について検討した。1)化学発光法ラジカルに特異的な化学発光試薬投与下に虚血・再潅流を行い心表面からの発光からラジカルを測定する。 光電子増倍管に連結した暗箱内にラットの潅流心を設置する。 この方法は高酸素濃度の潅流液による発光試薬の自動酸化が心筋からの発光測定を妨害する問題点を持つ。 このため心臓をupsideーdownに吊して流出液の心表面への排出を除いた。 化学発光試薬としては02・^^ーに特異性のあるLuciferin誘導体(MCLA 5μM)を用いた。 この実験で流出液の妨害除去をすれば心筋の発光を測定できることが明かとなったが、 再潅流時のラジカル発生は示せなかった。 また報告書作成時に流出液の影響を除かずに実験を行い再潅流後の発光増加を02・^^ーの発生と解釈した報告(Henry TD et al; Enhanced Chemiluminescence as aMeasure of OxygenーDrived Free Radical Generqation During Ischemia and Reperfusion. Circ Res 1990;67:14553ー1461)に対してその評価に問題があることが示せた。 ESR法で02・^^ーの捕促が出来たにもかかわらず、数百倍の感度を持つ化学発光法で観察されない原因は(1)02・^^ーによる発光のミオグロビンによるQuench、 (2)心筋表面での02・^^ー発生が少ないことが考えられる。結 論: ESR法で02・^^ーが促えられ、 直接証明ができた。 化学発光法は02・^^ーの検出には不十分であった。

The cause of the re-flow barrier substance and the origin of the acid element are noted. The life span of a chemical agent is extremely short. The purpose of this study is to determine the occurrence of the disease directly. In the first year of Heisei, the ESR method was used to show the origin of the acid. This year's annual review was held. 1)The chemical luminescence method is used to measure the luminescence of the surface of the center of the body by chemical luminescence test. Optoelectronic multiplier tubes are linked to the interior of the camera and the flow center is set. This method solves the problem of light emission test and automatic acidification of high acid concentration liquid. The upper side of the effluent is removed from the surface of the effluent. The chemical reagent was used for the specificity of Luciferin inducer (MCLA 5μM). The removal of impurities from the effluent was determined by the determination of the emission of light from the core and the emission of light from the effluent. Henry TD et al; Enhanced Chemiluminescence as a Measure of Oxygen Driven Free Radical Generation During Ischemistry and Reperfusion. Circ Res 1990;67:14553 - 1461) ESR method 02·^^ Conclusion: ESR method 02·^^, direct proof. The chemical method of light emission is not very effective.

项目成果

Ichimori,K et al: "同上:Superoxide dismutase reduces reperfusion injury without entering myocardiaum" Elsevier, 1559 (1989)

Ichimori, K 等人：“同上：超氧化物歧化酶可减少再灌注损伤而不进入心肌” Elsevier，1559 (1989)

L.Pronai, H.Nakazawa: "Superoxide scavenging activity of BGー104 before and after sonication determind by ESR spin trapping method." Biotherapy. 2. 63-68 (1990)

L.Pronai、H.Nakazawa：“通过 ESR 自旋捕获法测定超声处理前后 BG-104 的超氧化物清除活性。” 2. 63-68 (1990)。

H.Nakazawa et al: "Medical,Biological and Chemical Aspects of Free Radicals:Direct & Indirect Approaches to the demonstration of the link between radicals and myocadial injury" Elsevier, 1559 (1989)

H.Nakazawa 等人：“自由基的医学、生物和化学方面：直接

H.Nakazawa et al.: "The demonstration of DMPO superoxide adduct upon reperfision using a low nonーtonic concentration." Free Radical Research comumications.

H. Nakazawa 等人：“使用低非强效浓度的再灌注时 DMPO 超氧化物加合物的演示。”

L.Pronai,H.Nakazawa et al.: "Superoxide scavenging activity of BGー104 before and after sonication determind by ESR spin trapping method." Biotherapy. 2. 63-68 (1990)

L. Pronai、H. Nakazawa 等人：“通过 ESR 自旋捕获法测定超声处理前后 BG-104 的超氧化物清除活性。” 2. 63-68 (1990)。