初代培養神経細胞を用いたサイアミンの動態、生理作用欠乏病態生理に関する研究

利用原代培养神经元研究硫胺素动力学和生理作用缺陷病理生理学

• 批准号: 01570613
• 负责人: 橋本 泰道
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01570613/
• 关键词: サイアミン; 膜輸送; サイアミン欠乏症; Naチャネル

本研究は神経細胞におけるサイアミンの動態、生理作用、欠乏病態生理を明らかにするこはを目的とする。この目的のために1.ラット胎児脳の神経細胞の初代培養系の確立。妊娠18日(プラグ確認の日を0日とするの)ウイスタ-系ラットからエ-テル麻酔下に胎児を取り出し、実体顕微鏡下で海馬を切りだし、トリプシンで細胞に分離したのち、あらかじめポリリジンでコ-ティングしたプラスチックディッシュに播種した。培地は無血清完全合成培地を用いた。神経細胞以外の細胞の増殖を抑制するためにAraCを添加した。組織化学的検討により、培養10日目の細胞の約9割が神経細胞であることが確認された。なお、無菌的操作は今回購入したクリ-ンベンチ(十慈科学工業 NS-8B)、細胞の観察には倒立型顕微鏡(オリンパスIMT-2-11)を用いた。2.神経細胞におけるサイアミンの膜輸送の機構。サイアミンの神経細胞における膜輸送が単なる拡散か、キャリア-を介した拡散か、それとも能動輸送かを、現在検討中である。3.カイアミン欠乏における神経細胞の形態学的変化。培養神経細胞をサイアミン欠乏状態とし(サイアミンを含まない培地を用いる)、細胞の微細形態学的変化、特に初期におこる変化を、電子顕微鏡を用いて検討中である。4.培養神経細胞膜のNaチャネルにおけるサイアミンの作用。この実験に関しては、現在準備中である。

This study focuses on the dynamics, physiological functions, and physiological functions of neurogenesis. Objective: 1. Establishment of primary culture system of fetal neurocytes. On the 18th day of pregnancy (the day of confirmation), the fetus was removed from the hippocampus under microscope, and the cells were isolated from the hippocampus. No serum is available. AraC was added to inhibit proliferation of cells other than neurons. Histochemical analysis revealed that about 9 of the cells cultured for 10 days were isolated from neurons. Aseptic operation is now available for use with the inverted microscopes (ISM-2-11) for cell observation and the purchase of ISM NS-8B. 2. The mechanism of membrane transport in neurons. The membrane transport of the neurons is not easy to disperse, but it is easy to disperse. 3. Morphological changes of neurocytes due to lack of oxygen. Cultured neurons are in a state of depletion (including culture), micromorphological changes in cells, initial changes in characteristics, and examination with electron microscopy. 4. The role of sodium chloride in the development of cultured neuronal cell membranes. This is the first time I've ever been in the business.