平滑筋におけるカルシウムシグナルと収縮の分子機序

平滑肌钙信号和收缩的分子机制

基本信息

批准号：
01580155
负责人：
藤井敏弘
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞骨格タンパク質を中心とした本研究テ-マは直接的に関係する2つの主な発見、さらに本研究で用いた試料、技法などから波及したいくつかの成果が得られた。1.筋収縮の引き金となるCa^<2+>シグナルは平滑筋においてはミオシン軽鎖キナ-ゼ(MLCK)/ミシオン系とカルデスモン(CDM)/アクチン系の2つの経路に分かれて伝達される。両者の系はいずれもカルモジュリン(CaM)により媒介されるため、収縮やそれに伴う各種の生理現象が両方あるいはいずれかの系で働いているのか不明であった。そこで本研究ではCaMと同じファミリ-のCa^<2+>-結合タンパク質であるS100を用いたところ、S100がMLCK活性には影響を与えないがCDM)/アクチン系には、CaMと基本的に同じ作用を示すことを見いだした。その諸性質、薬物感受性を調べ、in vitroにおいて2つの系を区別する方法の確立とCaM以外のCa^<2+>-結合タンパク質の関与を示唆し、J.Biochem('90)に発表した。2.平滑筋にはまだ未知な収縮制御因子が存在する可能性が高いため新しい因子の探索を行った。この結果、アクチン/CaM/トロポミオシンの3者と結合する分子量33000のタンパク質を見つけP33と名付けた。P33のアクチンとトロポミオシン間の結合はCaMによりCa^<2+>濃度に依存的調節された。現在さらに詳しい性質を検討するとともに今までの成果を論文にまとめている。3.上記の研究で使用した試料、技法を応用して、イカ網膜から光反応と関連するものと思われるアクチン/CaM結合タンパク質を4種分離しFEBS Lett.('89)に報告した。また肝臓から膜結合型のCa^<2+->結合タンパク質の分離と性質、脳から微小管付髄タンパク質の新しい分離法の開発などに及んでいる。今後、分子生物学、細胞生物学などの手法も取り入れ発展させていく予定である。

这项针对细胞骨架蛋白的研究产生了与研究直接相关的两个主要发现，以及从本研究中使用的样品和技术触及的几种结果。 1。在平滑肌中，触发肌肉收缩的Ca^<2+>信号以两种途径传播：肌球蛋白轻链喹啉酶（MLCK）/肌动型系统和Caldesmon（CDM）/肌动蛋白系统。这两种系统均由钙调蛋白（CAM）介导，因此尚不清楚收缩和与它们相关的各种生理现象是否在两种系统中起作用。因此，在这项研究中，发现S100与CAM同一家族的Ca^<2+> - 结合蛋白发现S100不影响MLCK活性，但基本上确实与CDM中的CAM具有相同的效果）/肌动蛋白系统。结果通过检查其性质和药物敏感性，在J. Biochem（'90）中发表了一种方法，建立了一种区分两个系统的体外和Ca^<2+> - 结合蛋白的参与的方法。 2。由于平滑肌中仍然存在未知的收缩调节剂，我们搜索了新的因素。结果，发现了与三个肌动蛋白/CAM/Tropomyosin结合的分子量33,000的蛋白质，称为p33。 p33处肌动蛋白和肌动蛋白之间的结合以CA^<2+>浓度依赖性方式调节。目前，我们正在研究属性更深入，并在论文中总结结果。 3。使用上述研究中使用的样品和技术，从鱿鱼视网膜中分离出四种被认为与光反应相关的肌动蛋白/CAM结合蛋白，并报告给FEBS lett。（'89）。它还扩展到包括膜结合的Ca^<2+ - > - 与肝脏结合蛋白的分离和特性，以及开发用于将微管诱导髓质蛋白与大脑分离的新方法。将来，我们计划结合和开发分子生物学和细胞生物学等方法。