ヒト臍帯静脈内皮細胞の血管新生に及ぼすサイクリックヌクレオタイドの影響

环核苷酸对人脐静脉内皮细胞血管生成的影响

• 批准号: 02807087
• 负责人: 山内 一信
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02807087/
• 关键词: 血管内皮細胞; 血管新生; サイクリックAMP

血管新生は、炎症、固形腫瘍の増殖、虚血性心疾患における側副血行路の形成などに重要な役割を果たしている。近年、培養血管内皮細胞を用いた血管新生の研究が行われるようになったが、ヒトの内皮細胞による検討は少ない。本研究では、コラ-ゲンゲル上にヒト臍帯静脈内皮細胞を培養し、endothelial cell growth factor(ECGF)を加えて血管様構造物を形成させ、その定量化を試みた。また cAMP 誘導体や、adenylate cyclase のactivator である cholera toxin や forskolin の血管新生に及ぼす影響を検討した。ECGFを加えて培養すると数時間後には内皮細胞は、spindle様の形態変化を生じ、コラ-ゲンゲル内に侵入した。24時間を経過すると、索状構造物を形成し、48時間後には、血管様構造物を形成した。この血管様構造物を位相差顕微鏡には観察、撮像し、planimeterにて計測した。電顕にて、この血管様構造物の横断面を観察すると、1個から数個の細胞で構成されるさまざまな大きさの血管腔類似の構造物が認められた。コラ-ゲンゲル上の内皮細胞のmonolayerから連続しているものもあれば、完全に離れているものも認められた。ECGFは 10から 75μg/mlで濃度依存的に血管新生を促進したが、これ以上の濃度では、プラト-に達した。ECGFを加えないと血管様構造物は全く形成されなかった。dbcAMP(10^<ー4>,10^<ー3>M),8brcーAMP(10^<ー6>,10^<ー5>M)は ECGFの血管新生促進作用を有意に抑制した。Cholera toxin,forskolinには血管新生抑制作用は認められなかった。また、dbcGMPでは血管新生抑制作用は認められなかった。以上より、血管新生に外因性 cyclic AMP が関与していることが示唆された。

は angiogenesis, inflammation, the screw is swollen sores の raised colonization, virtual hemorrhagic heart disease に お け る vice blood on the road side の form な ど に important な "を cut fruit た し て い る. In recent years, culture endothelial cell を い た angiogenesis の が line わ れ る よ う に な っ た が, ヒ ト の endothelial cells に よ る 検 for less は な い. This study で は, コ ラ - ゲ ン ゲ ル on に ヒ ト umbilical 帯 を cultivate し venous endothelial cells, endothelial cell growth factor (ECGF) を え て vascular others structure を form さ せ, そ の quantitative を try み た. Youdaoplaceholder0 cAMP inducers や, adenylate cyclase activator である cholera toxin や forskolin に angiogenesis and ぼす effects を検 on た た. ECGF を plus え て cultivate す る と after several time に は は endothelial cells, spindle others の morphology variations を じ, コ ラ - ゲ ン ゲ ル に intrusion in し た. After 24 hours of を passed through すると, the cord-like structure を formed を, and after 48 hours of に, the vascular-like structure を formed た た. <s:1> vascular-like structures を phase difference 顕 micromirror に 観 観 examination, image extraction <s:1>, planimeterにて measurement <s:1> た. Electric 顕 に て, こ の vascular others structure の cross-sectional を 観 examine す る と, 1 か ら several の cells で さ れ る さ ま ざ ま な big き さ の similar の vascular cavity structure が recognize め ら れ た. コ ラ - ゲ ン ゲ の ル の on endothelial cells monolayer か ら even 続 し て い る も の も あ れ ば, completely に れ て い る も の も recognize め ら れ た. ECGF は 10 か ら 75 mu g/ml で concentration dependent に angiogenesis を promote し た が, こ れ の concentration above で は, プ ラ ト - に da し た. ECGFを plus えな を と と vascular-like structures を all く form されな った った った. DbcAMP (10 ^ 4 > < ー, 10 ^ < ー > 3 M), 8 BRC ー AMP (10 ^ 6 > < ー, 10 ^ 5 > < ー M) は ECGF の angiogenesis promoting effect を intentionally に inhibit し た. Cholera toxin,forskolinに に the inhibitory effect on angiogenesis is recognized as められな った った. The inhibitory effect of また, dbcGMPで で on angiogenesis で is recognized as められな った った. The above よ よ, the に exogenous cyclic AMP が of angiogenesis and the <s:1> て る る とが とが とが suggest された.

项目成果

Yoshiji Yamada: "Inhibitory Effects of Endothelial Cells and Calcium Channel Blockers on Platelet on Platelet Aggregation" Jpn Heart J. 31. 201-215 (1989)

Yoshiji Yamada：“内皮细胞和钙通道阻滞剂对血小板的血小板聚集的抑制作用” Jpn Heart J. 31. 201-215 (1989)

Yoshiji Yamada: "Protective effets of calcium channel blockers on hydrogen peroxide induced increases in endothelial permeability" Cardiovascular Res. 24. 993-997 (1990)

Yoshiji Yamada：“钙通道阻滞剂对过氧化氢诱导的内皮通透性增加的保护作用”心血管研究。

Yoshiji Yamada: "Roles of Calcium,Cyclic Nucleotides,and Protein Kinase C in Regulation of Endothelial Permeability" Arteriosclerosis. 10. 410-420 (1990)

Yoshiji Yamada：“钙、环核苷酸和蛋白激酶 C 在调节内皮渗透性中的作用”动脉硬化。