Generalization of nonisotopic DNA fingerprinting

非同位素 DNA 指纹分析的推广

• 批准号: 02557031
• 负责人: YAMANOUCHI Haruo
• 金额: $ 7.23万
• 依托单位: Niiqata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02557031/
• 关键词: DNA fingerprinting; Minisatellite; Enhanced chemiluminecent; Paternity testing; Zygosity diagnosis; DNAフィンガ-プリント; コ-ルド法; パ-オキシダ-ゼ標識法; myoプロ-ブ

DNA fingerprinting, developed by Alex Jeffreys, is used to identify individuals. This method visualizes minisatellite resins of chromosomes as highly polymorphic bands. We established a simple nonisotopic method for DNA fingerprinting using ECL (enhanced chemiluminecent) technique. This method has comparable resolution and sensitivity to regular radioactive procedures.The aim of this study was to allow conventional laboratories to routinely perform DNA fingerprinting analysis without the use of radioisotopes. DNA fingerprinting according to our protocol was carried out in 11 laboratories of legal medicine. Human DNAs from three individuals were digested with HaeIII and probed with peroxidase-labelled minisatellite "myo" Then the band patterns of the three obtained in each laboratory were compared. All of the investigators could detect clear bands on X-ray film. Those patterns of DNA fingerprint were not identical but very similar. These data revealed that it is difficult to know exact matching of samples on separate films. However, by examination of the DNA bands on one Southern blot this cold method could be applied to paternity testing and zygosity diagnosis.

DNA 指纹识别由 Alex Jeffreys 开发，用于识别个人身份。该方法将染色体的小卫星树脂可视化为高度多态性带。我们利用 ECL（增强化学发光）技术建立了一种简单的非同位素 DNA 指纹分析方法。该方法具有与常规放射性程序相当的分辨率和灵敏度。本研究的目的是让传统实验室能够在不使用放射性同位素的情况下常规进行 DNA 指纹分析。根据我们的方案，DNA 指纹识别在 11 个法律医学实验室进行。用 HaeIII 消化来自三个个体的人类 DNA，并用过氧化物酶标记的小卫星“myo”进行探测，然后比较每个实验室获得的三个人的条带模式。所有研究人员都能在 X 射线胶片上检测到清晰的条带。这些 DNA 指纹图案并不完全相同，但非常相似。这些数据表明，很难知道不同胶片上样本的精确匹配。然而，通过检查 Southern 印迹上的 DNA 带，这种冷方法可以应用于亲子鉴定和接合性诊断。

项目成果

Naito Emiko: "Ribosomal ribonucleic acid(rRNA) gene typing for species identification" J Forensic Science. 37-2. 396-403

Naito Emiko：“用于物种鉴定的核糖体核糖核酸 (rRNA) 基因分型”J Forensic Sc​​ience。

出羽 厚二: "ミニサテライトDNAの生物学的・医学的意義ーDNAフィンガープリント法の応用ー" 最新医学. 46. 79-83 (1991)

Atsuji Dewa：“小卫星 DNA 的生物学和医学意义 - DNA 指纹识别的应用”现代医学 46. 79-83 (1991)。

Naito: "Ribosowal Ribonucleic Acid(rRNA)Gene Typing for Species Identification" Journal of Forensic Science. 37. 396-403 (1992)

Naito：“用于物种鉴定的 Ribosowal 核糖核酸 (rRNA) 基因分型”《法医学杂志》。

内藤 笑美子: "サザン法の原理と実際-Coldプローブの導入" 実験医学. 19. 14-19 (1991)

Emiko Naito：“南方方法的原理和实践 - 冷探针的介绍”实验医学。 19. 14-19 (1991)

Naito Emiko: "DNA fingerprinting with enhanced chemiluminescent method" Experimental Medicine. 9-10. 14-19 (1991)

Naito Emiko：“增强化学发光法的 DNA 指纹分析”实验医学。