菌体内物質の選択的放出及び分離法の開発に関する研究

细胞内物质选择性释放与分离方法的研究进展

• 批准号: 02650680
• 负责人: 松本 幹治
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Yokohama National University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 1991
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02650680/
• 关键词: 細胞破壊; 酵素放出; 酵母内酵素; ホモジナイザ-

本科研費で購入した高圧剪断細胞破壊装置でパン酵母を破壊し,酵母内酵素を放出させた。各酵素の放出特性(最大放出量,放出速度)に及ぼす操作因子(破壊圧力,処理回数,分散媒の塩濃度)の影響を調べ,以下の結果がえられた。1)純水を分散媒とした場合の各酵素の放出量と処理回数の関係は,細胞壁周辺にある酵素ADH(アルコ-ル脱水素酵素),HK(ヘキリキナ-ゼ)は細胞内部にある酵素G6PDH(グルコ-ス6リン酸脱水素酵素),6PGDH(6リン酸グルコ-ス脱水素酵素)より少ない破砕回数で最大酵素放出量に達した。同様の傾向は操作圧力20〜80Mpaの範囲でみられたが,各酵素とも圧力の増大に伴い放出速度も増加した。2)放出速度に及ぼす操作圧力の影響は各酵素により異なり,40Mpa以上においては細胞壁周辺にあるADHおよびHKの放出速度は圧力の影響を受け易く,細胞内部の6PGDHなどはその影響は受けにくいことがわかった。3)放出速度に及ぼすNaClの影響は,Nacl濃度0.1mol/lの時ADH,HKの放出速度が最も大きいのに対して,G6PDH,6PGDHは塩濃度の増加と伴に減少した。また硫安に関しては濃度0.1〜0.2mol/lの時ADH,HKの放出速度は最大値を示し,G6PDH,6PGDHはNaClの場合と同様に塩濃度の増加につれて徐々に減少した。すなわち,細胞壁周辺にある酵素は適量の塩を添加することにより破砕速度を増加させることが可能であり,逆に細胞内部にある酵素では放出を抑制できることがわかった。4)最大放出酵素量に及ぼす塩濃度の影響については,6PGDHは塩の添加により最大放出量は増加したが,他の酵素は塩濃度の影響をほとんど受けなかった。

This research fee was used to purchase a high-pressure shear cell disruption device for yeast disruption and enzyme release. The effects of enzyme release characteristics (maximum release amount, release rate) and operating factors (breakdown pressure, number of cycles, dispersion medium concentration) were adjusted. 1)The relationship between the amount of each enzyme released and the number of treatment cycles in the case of pure water dispersion was that the enzyme ADH(alpha-D-dehydro),HK(alpha-D-H) were found in the cell wall periphery, and the enzyme G6PDH (alpha-D-H),6PGDH(alpha-D-H) were found in the cell interior. The same tendency is to increase the operating pressure from 20 MPa to 80MPa, and the release rate of each enzyme increases with the increase of operating pressure. 2)The effect of release rate and operating pressure on each enzyme varies from 40Mpa to 40Mpa. The effect of release rate and operating pressure on ADH and HK on cell wall circumference is easy to be affected, and the effect on 6PGDH inside the cell is easy to be affected. 3)The release rates of ADH and HK were the highest when NaCl concentration was 0.1mol/l, while the release rates of G6PDH and 6PGDH decreased with the increase of NaCl concentration. When sulfur concentration is 0.1 ~ 0.2mol/l, the maximum value of emission rate of ADH and HK is shown. When G6PDH and 6PGDH NaCl concentration is increased, the emission rate decreases gradually. The enzyme in the cell wall is added in an appropriate amount, and the enzyme in the cell wall is released in an inhibited manner. 4)The maximum amount of enzyme released and the effect of enzyme concentration are not affected by the addition of 6PGDH. The maximum amount of enzyme released increases and the effect of enzyme concentration is not affected.

项目成果

松本 幹治: "高圧剪断破壊法による酵母内酵素の放出特性" 化学工学第56年会(1991年3月,東京).

Mikiharu Matsumoto：“通过高压剪切断裂法释放酵母中酶的特性”第 56 届化学工程年会（1991 年 3 月，东京）。