Immunosympathectomy動物における交感神経活動代償機構の解析

免疫交感神经切除动物交感神经活动代偿机制分析

• 批准号: 02670052
• 负责人: 小川 正晴
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kochi Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02670052/
• 关键词: 神経成長因子(NGF); 抗NGF抗体; ラット; 組織蛍光法; MAO電顕組織化学; 眼瞼下垂; 自律性C線維

内因性神経成長因子(NGF)は、胎生期の交感神経節細胞の分化と成長を促進し、成熟交感神経節細胞の生存と機能維持に必須なpolypeptideである。逆にまた、胎生期に抗NGF抗体を投与し、内因性NGFを枯渇させる操作は、immunosympathectomyとよばれている。しかし、この操作が末梢神経系におよぼす影響についての報告は少なく、とりわけ定量的検討はなされていない。それは従来、交感神経線維を形態学的に同定する方法が確立されていなっかたことにもよる。今回は、内因性NGFの枯渇が、末梢性自律神経系におよぼす影響を組織化学的方法を用いて定量的に検討した。約300匹のマウス顎下腺より、Bocciniらの方法に準じて、NGFを抽出した。ついで、2.5SNGFを家兎に免疫し、その抗血清をStoeckelらの方法にもとずいて、アフィニティ-クロマトグラフィ-を通し、抗体を用いて作成した。ラットに生直後から抗NGF抗体1μg/g,10μg/gを5日間皮下注し、4週間後に上頚部交感神経節の大きさを対照と比較した。また、対照と抗体10μg/g投与群において、血圧値を比較するとともに、左心室後壁、腸管膜動脈、結さつ坐骨神経に分布する交感神経を組織蛍光法を用いて観察した。さらに、Monomine Oxidase(MAO)染色電顕法を行った。その結果、上頚部交感神経節は抗体の用量依存的に萎縮を示した。抗NGF抗体処理群では著明な眼瞼下垂を呈し、また対照と比べて血圧の低値を認めた。組織蛍光法による観察では、抗体投与群で、左心室、腸管膜動脈、坐骨神経内のカテコ-ルアミン蛍光が著明に減弱を示していた。また、immunosympathectomyによって、坐骨神経内の無髄線維の約16%を構成するMAO陽性線維が、平均86%の脱落を示した。この事実は、MAO陽性線維が自律性C線維であることを強く示唆している。本法を用いることにより、交感神経障害モデル動物の作成が可能である。

Endogenous neurogrowth factor (NGF), the differentiation and と growth of <s:1> sympathetic neuroganglion cells <s:1> during the fetal period を promote the survival and と function maintenance of <s:1> and mature sympathetic neuroganglion cells <e:1> に essential なpolypeptideである. Reverse にまた, prenatal に anti-NGf antibody を administration to, endogenous NGFを dry 渇させる operation, immunosympathectomyとよばれて る る. し か し, こ の が endings god 経 operation department に お よ ぼ す influence に つ い て の report less は な く, と り わ け of quantitative 検 は な さ れ て い な い. そ れ は 従, sympathetic god d を morphology に 経 line with fixed す が る method established さ れ て い な っ か た こ と に も よ る. This time, the <s:1>, endogenous NGF <s:1> is 渇が, and the peripheral autonomic nervous system におよぼす affects the を histochemical method を, using the に検 て quantitative に検 to investigate the た. About 300 horsepower of <s:1> ウス ウス submandibular gland よ, Bocciniら <s:1> method に accurate じて, NGFを extraction た. つ い で, 2.5 SNGF を home 兎 に immune し, そ の antiserum を Stoeckel ら の way に も と ず い て, ア フ ィ ニ テ ィ - ク ロ マ ト グ ラ フ ィ - を を し, antibody with い て made し た. ラ ッ ト に born straight after か ら resistance model NGF antibody 1 mu g/g, 10 mu g/g を 5 day after subcutaneous injection し, 4 weeks between に 頚 section of the sympathetic god 経 の big き さ を polices according to と compare し た. ま た, polices according to と antibody 10 mu cast with group of g/g に お い て, blood 圧 numerical を compare す る と と も に, left ventricular posterior wall, insufflate membrane artery, knot さ つ sciatic god 経 に distribution す る sympathetic god 経 を organization 蛍 を optical method using い て 観 examine し た. Youdaoplaceholder0, Monomine Oxidase(MAO) staining electro顕 method を line った. Youdaoplaceholder0 <s:1> results, the dose-dependent に atrophy を of the <s:1> antibody <s:1> in the upper 頚 sympathetic neurosegment shows that <s:1> た た. Anti-ngf antibody treatment group で で obvious な ptosis を presenting as な, また compared with と slightly lower blood pressure べて を recognized めた. Organization 蛍 method に よ る 観 examine で は, cast with antibody group で, left ventricle, insufflate membrane artery, sciatic god 経 の カ テ コ - ル ア ミ ン 蛍 light が weakened the Ming に を shown し て い た. Youdaoplaceholder0, immunosympathectomyによって, and approximately 16%を of the unmedullary thread dimensions in the ischial Shinto constitute するMAO positive thread dimensions が, and an average of 86% of the thread shedding を indicates た. The <s:1> positive line dimension of <s:1> and MAO is が, the self-regulatory C line dimension is である とを, and the strong く indication is て る る る. This law を is made by using the を る とによ とによ and the sympathetic nervous disease モデ モデ of the animal を to make が possible である.

项目成果

H.Hara,T.Moriki,M.Togo,M.Ogawa: "Electron Microscopic Localization of Acridine Orange Chronatin Interaction Products in Rat Pheochromocytoma PC12 cells." Path.Res.Pract.186. 102-109 (1990)

H.Hara、T.Moriki、M.Togo、M.Okawa：“大鼠嗜铬细胞瘤 PC12 细胞中吖啶橙 Chronatin 相互作用产物的电子显微镜定位。”

K.Matsubayashi et al: "High Altitude Medical Science" G.Ueda et al,Shinshu University puss, 279-283 (1988)

K.Matsubayashi 等：“高海拔医学科学” G.Ueda 等，信州大学 puss，279-283 (1988)

松林 公蔵他: "老年期痴呆の危険因子と予防" 臨床科学. 27. 20-27 (1991)

Kozo Matsubayashi 等人：“老年痴呆症的危险因素和预防”《临床科学》27. 20-27 (1991)。

K.Matsubayashi et al: "Localization of monoamine oxidase (MAO) in the rat peripherd nervous systemーExistence of MAOーContaining unmyelinated axons." Brain Research. 368. 30-35 (1986)

K. Matsubayashi 等人：“单胺氧化酶 (MAO) 在大鼠周围神经系统中的定位 - MAO 的存在 - 含有无髓鞘轴突。” 368. 30-35 (1986)。

M.Ogawa and G.Pilar: "A Dissection and Tissue Culture Manual of the Nervous System" A.Shahar,J.devellis,A.Vernadakis & B.Habered,Alan R.Liss,Inc, 340-342 (1989)

M.Okawa 和 G.Pilar：《神经系统解剖和组织培养手册》A.Shahar、J.devellis、A.Vernadakis