毛根形成についてのin vitro培養系による基礎研究

利用体外培养系统进行毛根形成的基础研究

• 批准号: 02670556
• 负责人: 塩谷 信幸
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02670556/
• 关键词: ラット胎児; 上唇; 毛根; 細胞集合; sorting out; 組織分化; in vitro培養

本研究は、毛根を構成する細胞をまず単離し、この単離細胞の再集合塊がin vitroで毛根を再形成する能力を保持しているかを知るための基礎研究として、ラット胎生期の上唇部細胞を用いた検討を行い、以下の成果を得た。胎令15日胚より採取した上唇部組織塊をトリプシン処理して細胞を解離した後、次のような二段階培養を行った。第一段階(旋回培養)では、解離細胞を、10%牛胎児血清、3%ニワトリ胚抽出液を含む培養液(Dulbecco変法Eagle medium,Ham F12の1:1混液)中で24時間37℃で、60rpmの回転速度で旋回した。この培養の間に進行する上皮ー間充織相互作用の結果、毛根原基様構造を含む細胞再集合塊が形成された。毛根形成はこの培養ではそれ以上進行しないため、第二段階の培養として、再集合塊をコラ-ゲン破覆Nuclepore膜上に移し、上述培養液(ただし牛胎児血清を除く)上での静置浮遊培養を行った。6ー7日間の培養により、集合塊中の毛根原基は毛根へと分化した。こうして純粋にin vitro下で形成された毛根の光学顕微鏡的特徴とその大きさは、in vivoで発生中の胎令18日胎児の上唇部毛根に匹敵した。さらに電子顕微鏡レベルの組織分化、細胞分化の程度も正常な成体の毛根と基本的に同等であることが判明した。即ち、角化した毛幹、内毛根鞘、外毛根鞘の全てが同定された。内毛根鞘は根鞘小皮、Huxley層(トリコヒアリン顆粒を含む)、Henle層を含み、また毛根基部には毛母基と乳頭部の明確な分化がみられた。このように、細胞のsorting outから毛根の完成に至る、全ての組織形成過程の正常な進行が可能なin vitro実験系は、毛根形成の解析系として有効であり、また毛根に関する治療学の分野の発展のためにも重要な基礎的知見を約束するものと考えられる。

In this study, the hair root constitutes the reassembled block of the single cell and the reassembled block of the single cell. Basic research on the ability to re-form and maintain the hair root in vitro The following results were obtained by using the cells of the upper lip of the fetus during the birth period. On the 15th day of pregnancy, the embryo was harvested from the upper lip tissue block and processed with a sterile cell dissociation system, followed by a two-stage culture. The first stage (rotary culture) contains culture medium containing dissociated cells, 10% fetal bovine serum, and 3% Dulbecco embryonic extract medium (Dulbecco method Eagle medium, Ham F12 (1:1 mixture) can be rotated at 37℃ for 24 hours and at a speed of 60rpm. As a result of the interaction between epithelium and mesenchyme in the culture, the structure of the hair root primordium contains cells that are reassembled and formed. The hair root formation and cultivation are carried out above, and the second stage of cultivation is carried out, and the block is broken again. The Nuclepore membrane was transferred to the above-mentioned culture medium (fetal bovine serum was removed), and the culture medium was allowed to stand and float for culture. 6 to 7 days of cultivation, hair root primordium and hair root differentiation in the collection block. The characteristics of the こうして pure 粋に in vitro and the されたhair rootのoptical microscopic lens are the same. The degree of tissue differentiation and cell differentiation of さらにelectronic microscopy is the same as that of normal adult hair roots. That is, the keratinized hair shaft, the inner hair root sheath, and the outer hair root sheath are all together. The inner hair root sheath, the root sheath cuticle, the Huxley layer, the Henle layer, the hair root base, the hair mother base, and the papilla are clearly differentiated.このように、cell sorting outからhair rootのcompleteに～、full tissue formation process のnormal progress がpossibleなin The in vitro system is effective, the hair root formation analysis system is effective, and the hair root is closed. The division of therapy is based on the important knowledge and restraint of the knowledge and knowledge of the subject.

项目成果

渡辺 真理子: "Hair follicle formation from a single cell suspension of rat skin by a dualーstep in vitro culture" Cell and Tissue Research.

Mariko Watanabe：“通过双步体外培养从大鼠皮肤的单细胞悬浮液中形成毛囊”细胞和组织研究。