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CRF及びACTH関連ペプチドの基礎的、臨床的研究

CRF和ACTH相关肽的基础和临床研究

基本信息

批准号：
02671111
负责人：
須田俊宏
金额：
--
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02671111/
关键词：
CRF POMC 糖質コルチコイド視床下部下垂体 CRF結合タンパク

项目摘要

【目的】2. CRFー結合蛋白(CRFーBP)の内分泌学的検討と純化。3. Cushing病の病態生理を検討するため、下垂体腺腫細胞のGR mRNAのcharacterizationを行った。【方法】1. ラットに両側副賢摘出術を行い、糖質コルチコイド(GC)投与群と非投与群との間で、脳内及び下垂体前葉のPOMC、CRF及びGR mRNAsの変動をNorthern blot法で解析した。2. CRFーBPのGCによる影響を調べるため、各種内分泌疾患の血中CRFーBP結合能をcrossーlink法で解析した。3. CRFーBPをaffinity column、HPLC、SDSーPAGEを用いて純化した。4. Cushing病下垂体腺腫細胞を単層培養した後、GR mRNAを抽出、Northern blot法で解析した。【結果】1. 視床下部、下垂体のCRF、POMC、GRの各mRNAは、両側副賢摘出で増加し、GCでdown regulationを示した。2. CRFーBPレベルは、糖質コルチコイドで減少した。3. SDSーPAGE上、single bandのCRFーBP fractionが得られた。4. Cushing病下垂体腺腫細胞のGR mRNAは、視床下部GR mRNAとNorthern blot法による解析で差がなかった。

[Purpose] 2. Study and purification of CRF-binding protein (CRF-BP) in endocrinology. 3. The pathological physiology of Cushing's disease and the characterization of GR mRNA in pituitary adenoma cells. [Method] 1. Lateral accessory hysterectomy, GC injection and non-injection, POMC, CRF and GR of the anterior pituitary gland The analysis of mRNAs is done by Northern blot method. 2. The binding energy of CRF-BP in the blood can be analyzed using the cross-link method to determine the influence of CRF-BP on the regulation of various endocrine diseases. 3. CRF, BP and affinity column, HPLC and SDS-PAGE are purified using the same method. 4. Cushing's disease pituitary adenoma cells were cultured in a single layer, and GR mRNA was extracted and analyzed by Northern blot method. [Results] 1. The expression of CRF, POMC, and GR in the lower part of the optic bed and the pituitary gland, and the expression of GC downregulation after excision of the lateral accessory epithelium. 2. CRFーBPレベルは, sugar content reductionした. 3. On SDSーPAGE, single bandのCRFーBP fractionが得られた. 4. The GR mRNA in pituitary adenoma cells in Cushing's disease and the GR mRNA in the lower optic bed are analyzed by Northern blot method.