カイコの脳ー側心体ーアラタ体複合体における前胸腺刺激ホルモンの分泌機構

家蚕脑-侧体-翼复合体前胸激素的分泌机制

基本信息

批准号：
03660056
负责人：
相薗泰生
金额：
--
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03660056/
关键词：
前胸腺刺激ホルモン(PTTH)エクダイソン特異的モノクロ-ナル抗体エクダイソンのラジオイムノアッセイカイコ(5令期)体液中PTTH量の変動脳複合器官におけるPTTHの分泌 Ca^<2+>イオン依存性PTTH分泌アセチルコリンによるPTTHの分泌天蚕脳内エピネフィリン

项目摘要

昆虫の脱皮・変態を調節制御する内分泌カスケ-ドに関連して、カイコの脳ー側心体ーアラタ体複合体における前胸腺刺激ホルモン(PTTH)の分泌機構の解明を試み、次のような成果を得た。(1)Ecdysoneに対するモノクロ-ナル抗体(Ka:1.3X10^<10>M^<-1>)を作製し、10〜300pgのecdysoneを測定できる高感度ラジオイムノアッセイ系を確立した。(2)ワンダリング当日の前胸腺は、PTTHに対する感受性が高く、自発的ecdysone分泌量も少なかったので、この時期の前胸腺を用いて、0.2〜10unitsのPTTHが測定可能なin vitroアッセイ系を確立した。(3)5令期における体液中PTTHの力価を測定することにより、5令初期(Day1〜2)、ワンダリングの3日前及び前日、ワンダリング後の2日間、ecdysteroid濃度が最高となる直前の5回にわたりPTTHが体液中に分泌されることを明らかにした。この実験結果に基づき、脳ー側心体ーアラタ体複合体におけるPTTHの分泌機構解明の実験は、自発的分泌が少なく内的刺激に応答する5令3日目の複合体を用いることにした。(4)Ca^<2+>イオン(4.5mM)存在下、高濃度のK^+イオン(60mM以上)により複合体からのPTTH分泌が誘起されることを見出した。また、この分泌は、4種の神経伝達物質によっても促進され、刺激から分泌までに要する時間は、アセチルコリン、ド-パミン、ダルタミン酸、セロトニンの順であった。これらの実験結果から、アセチルコリンが、「刺激ー分泌連関」において、神経分泌細胞を刺激することにより軸索末端に活動電位を生じさせ、Ca^<2+>イオンの流入とこれに次ぐPTTHの分泌を引き起こしているものと推定した。(5)天蚕における光周性依存休眠覚醒の前後で、脳内カテコ-ルアミンは著しい変動を示し、休眠蛹に存在していないエピネファリンが覚醒後に増大することを見出した。この増大と脳内PTTH分泌との関連性は興味深い今後の課題である。

关于调节和调节昆虫摩擦和变态的内分泌级联反应，我们试图阐明丝虫虫的脑壁alatar alatar蛋白酶复合物中促噻吩并刺激激素（PTTH）的分泌机制，并取得了以下结果。（1）制备了针对ecdysone的单支抗体（Ka：1.3x10^<10> m^<-1>），并建立了高度敏感的放射免疫测定系统，能够测量10-300 pg的ecdysone。（2）胸粘膜粘膜对PTTH高度敏感，并且自发性Ecdysone分泌的量很小，因此我们建立了一个体外测定系统，该系统目前可以使用原胸膜粘膜在0.2至10单元之间测量PTTH。（3）通过测量第5个学期中体液中PTTH的滴度，据透露，在第5个学期开始（1-2天），在徘徊前的前一天和在徘徊前两天，ptth五次分泌到体液中五次，在徘徊前两天，就在ecdysteroid浓度之前。基于这个实验结果，我们决定在第5天使用该复合物，该复合物几乎没有自发分泌，并且对内部刺激做出了反应。（4）我们发现，在存在Ca^<2+>离子（4.5 mm）的情况下，来自复合物的PTTH分泌是由高浓度的K^+离子（60 mm或更多）诱导的。这种分泌也通过四种类型的神经递质促进，刺激到分泌所需的时间是乙酰胆碱，多巴胺，达甲酸酯和5-羟色胺的顺序。从这些实验结果中，估计乙酰胆碱通过刺激“刺激分泌链接”中的神经分泌细胞在轴突末端产生动作电位，从而导致Ca^<2+>离子的流入和PTTH的后续分泌。（5）我们发现，大脑中的儿茶酚胺在光周期依赖的休眠觉醒前和之后表现出明显的波动，而在休眠pupa中不存在的肾上腺素在醒来后不存在。这种增加与脑部PTTH分泌之间的关系是一个有趣的未来问题。