イネ種子二機能性酵素インヒビタ-のcDNA機造解析と組織特異的発現

水稻种子双功能酶抑制剂cDNA机制分析及组织特异性表达

基本信息

  • 批准号:
    03660086
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.96万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    1991
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1991 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

イネ科種子のαーアミラ-ゼは発芽生理の上で重要な酵素であるが、最近、申請者らは、イネ種子中にこの内生のαーアミラ-ゼとズブチリンを阻害する二機能性酵素インヒビタ-(RASI)が存在することを明らかにした。また、その種子内蓄積部位は糊粉層であり胚曜にはほとんど存在しないこと、このことは大麦の二機能性インヒビタ-(BASI)の局在部位と正反対であることを見出した。そこで同じイネ科移物種子内でのこの相違に注目し、二機能性酵素インヒビタ-遺伝子の組織特異的発現の多様性のメカニズムを遺伝子レベルで明らかにすることを最終目標として、本研究ではRASIのcDNAのクロ-ニングを行なうと共にオルガネラ局在性を調べた。開花後22日のイネ種子から単離したmRNAに対するcDNAをλgt11組み込んでcDNAライブラリ-を作成した。RASIのN末端アミノ酸配列をもとに作成したオリゴヌクレオチドをプロ-ブとするプラ-クハイブリダイゼ-ションによってこのcDNAライブラリ-をスクリ-ニングした結果、複数の陽性クロ-ンを得た。これらをファ-ジミドpBluescriptに組み込み、サブクロ-ニングした。現在、これらのクロ-ンの構造解析を進行中である。一方、RASIタンパク質の種子内局在部位をオルガネラレベルで決定するために、米糠より非水系溶媒を用いる分画遠心法によりアリュ-ロン顆粒を単離した。抗ーRASI抗体を用いるウェスタンブロッティング分析によりアリュ-ロン顆粒にRASIが蓄積していることを明らかにした。今後は、単離したcDNAの塩基配列を決定し、RASIの一次構造を明らかし、さらに遺伝子の構造解析を行なう。また、このcDNAをプロ-ブとして、RASI遺伝子の組織特異的発現様式を調べる。これらの結果を総合してイネ種子における二機能性酵素インヒビタ-の組織特異的発現の分子レベルでのメカニズムを解明する計画である。
The α-amyloid-α-amyloid-α-amyloid-amyloid-α-amyloid-amylo In the seed, the accumulation position of aleurone grain is opposite to that of the embryo, and the two functional positions of barley are opposite. The aim of this study is to investigate the regulation of RASI cDNA in the development of tissue-specific expression of two functional enzymes, RASI cDNA and RASI cDNA. 22 days after flowering, the seeds are separated from the mRNA, and the cDNA is divided into 11 groups. RASI's N-terminal amino acid sequence is produced in a variety of ways, such as by adding a protein to the cDNA sequence, and by adding a protein to the cDNA sequence. This is the first time I've ever seen a picture of you. Now, the structural analysis is in progress. A method of separating rice bran from non-aqueous solvent is proposed. Anti-RASI antibodies are used in the analysis of RASI accumulation. In the future, we will determine the nucleotide sequence of RASI cDNA, and analyze the structure of RASI cDNA. The tissue-specific expression pattern of RASI gene was modulated. The results of this study were summarized into two functional enzymes for tissue-specific production of molecular enzymes for seed production.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
山形 裕士: "Purification and Characterization of a Subtilisin Inhibitor from Rice Seeds."
Yuji Yamagata:“水稻种子中枯草杆菌蛋白酶抑制剂的纯化和表征”。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
山形 裕士: "Nucleotide Sequence of a cDNA that Encodes a Rice Subtilisin/αーamylase Bifunctional Inhibitor"
Yuji Yamagata:“编码水稻枯草杆菌蛋白酶/α-淀粉酶双功能抑制剂的 cDNA 的核苷酸序列”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ patent.updateTime }}

山形 裕士其他文献

Characterization of an aluminum chelator synthsized by the...(2005)
由...合成的铝螯合剂的表征(2005)
ダイズフラボノイド合成系酵素遺伝子のcGMPによる発現調節機構の解析
cGMP分析大豆黄酮合成酶基因表达调控机制

山形 裕士的其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

{{ truncateString('山形 裕士', 18)}}的其他基金

光応答性遺伝子の発現を調節する光シグナル伝達機構の生化学的解析
调节光响应基因表达的光信号转导机制的生化分析
  • 批准号:
    12025219
  • 财政年份:
    2000
  • 资助金额:
    $ 0.96万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
植物の光シグナル伝達機構を仲介するプロテインキナーゼの同定と機能解析
介导植物光信号转导机制的蛋白激酶的鉴定和功能分析
  • 批准号:
    11878119
  • 财政年份:
    1999
  • 资助金额:
    $ 0.96万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
一酸化窒素(NO)は植物の細胞内情報伝達物質として機能しているか?
一氧化氮(NO)在植物中是否充当细胞内信号传递者?
  • 批准号:
    09876093
  • 财政年份:
    1997
  • 资助金额:
    $ 0.96万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
各種フッ素樹脂の熱分解毒性について
关于各种氟树脂的热分解毒性
  • 批准号:
    58770411
  • 财政年份:
    1983
  • 资助金额:
    $ 0.96万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
{{ showInfoDetail.title }}

作者:{{ showInfoDetail.author }}

知道了