植物の光シグナル伝達機構を仲介するプロテインキナーゼの同定と機能解析

介导植物光信号转导机制的蛋白激酶的鉴定和功能分析

基本信息

  • 批准号:
    11878119
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.34万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    1999
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1999 至 2000
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

光シグナル伝達物質の分子的実体の解明を目的として、光シグナル伝達を仲介するプロテインキナーゼの精製と特性解析を行った。前年度までにダイズ光独立栄養培養細胞(SB-P細胞)の可溶性画分に、光依存的な一過的チロシンリン酸化を受けて活性化する46 kDaセリン/スレオニンプロテインキナーゼを検出し、LAPK(light-signal activated protein kinase)と名付けた。本年度はLAPKの精製を進め、分子量(46 kDa)とヒストンキナーゼ活性を指標に各種クロマトグラフィーによりインゲルアッセイでプロテインキナーゼとしては単一のバンドにまで精製した。部分精製した46kDaプロテインキナーゼの特性を解析し、本酵素の活性化/不活性化はチロシン残基のリン酸化/脱リン酸化を伴うことや、本酵素がMBPとヒストンをリン酸化するが、カゼインをリン酸化しないことなどを明らかにした。これらの精製酵素の性質は細胞抽出液を用いて既に明らかにしたLAPKの性質と一致した。また、これらの性質はMAPキナーゼの性質とも一致し、LAPKがMAPキナーゼ様プロテインキナーゼの一員であることが推察された。さらに、過酸化水素やUV-Aでは活性化されなかったことから、LAPKの光による活性化は活性酸素等による二次的な影響ではないと考えられた。今後、本酵素の完全精製と部分構造解析、cDNAクローニング、さらに遺伝学的手法による機能解析を進め、引き続き光シグナル伝達におけるLAPKの役割を解明する。
The molecular properties of light emitting substances are analyzed for the purpose of light emitting, and for the purification of light emitting substances. In the past year, the soluble protein, light-dependent protein kinase and LAPK(light-signal activated protein kinase) of light-independent cultured cells (SB-P cells) were activated by 46 kDa protein. This year, LAPK was refined, molecular weight (46 kDa) and activity index were improved. Analysis of properties of partially purified 46kDa protein, acidification/deacidification of activated/inactivated residues of this enzyme, and acidification/deacidification of MBP protein residues of this enzyme The properties of the purified enzyme are identical to those of the cell extract. The nature of the map is consistent with the nature of the map. The LAPK is a member of the map. For example, if the UV-A is activated, the LAPK is activated. In the future, complete purification, partial structure analysis, cDNA sequencing, genetic analysis, functional analysis, introduction of the enzyme, and identification of LAPK enzyme will be discussed.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Hiroshi Yamagata: "Light activates a 46-kDa MAP kinase-like protein kinase in soybean cell culture"FEBS Letters. (in press). (2001)
Hiroshi Yamagata:“光激活大豆细胞培养物中的 46 kDa MAP 激酶样蛋白激酶”FEBS Letters。
  • DOI:
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    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
I.Yoshida: "Blue-and red-light regulation and circadian control of gene expression of S-adenosylmethyionine decarboxylase in Pharbitis nil"J.Exp.Bot.. 13(6). 763-772 (1998)
I.Yoshida:“Pharbitis nil 中 S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因表达的蓝光和红光调节和昼夜节律控制”J.Exp.Bot.. 13(6)。
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  • 通讯作者:
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