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鶏始原生殖細胞の細胞生物学的特性の解析と、その培養系の確立

鸡原始生殖细胞生物学特性分析及培养体系的建立

基本信息

批准号：
03660286
负责人：
西田隆雄
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至 1992
项目状态：
已结题

项目摘要

ニワトリ胚子生殖腺における始原生殖細胞(PGCs)の分化および生殖腺組織とPGCsの培養系の確立について、以下の結果をえた。1. 卵割期および胚盤胞期の細胞のレクチン結合パターンの変化によって示される糖鎖構造の動態を、ABC法によって検討した。卵割初期では全割球の細胞質がGSIIに陽性反応を示し、中間層の細胞質のみが特異的にBPAと反応した。この反応は卵割中期には消失した。放卵後の胚盤葉期では、明域の胚盤葉細胞にのみ陽性反応が認められた。これらの結果は、ニワトリ初期胚においても両生類割球に類似した細胞質成分の局在性の存在することを示すものであるが、このレクチン結合パターンの差異が性形質の動態を示すかどうかは、なお不明である。2. 生殖腺組織の培養系を確立するため、孵卵6日齢の未分化生殖腺を、10%ウシ胎仔血清(FCS),1%グルタミン-ペニシリン-ストレプトマイシン 119培地で2〜13日間培養した。雄性生殖腺は正常胚と同じように性分化したが、雌性生殖腺には、性索、白膜および皮質・髄質の分化は認められず、生殖細胞はコロニーを形成し、卵精巣様構造に分化した。また、雄性生殖腺の分化は、FCSを含まぬ培地でよりよく進行することが明らかにされた。以上のことから培養条件下で、雄性生殖腺は自律能にしたがって、遺伝的性分化を発現するが、雌性生殖腺の性分化には、FCSに含まれるエストロジェンなど外的要因(Erickson,1974)を考慮する必要があり、現在なお検討中である。3. 始原生殖細胞の培養系については、熊本大学医学部解剖学第1講座の指導をえて、孵卵2日齢の初期胚子血流から移動期の始原生殖細胞を単離し、その培養系の確立と単離細胞群を免疫原とする単クローン抗体の作製を現在試みている。

The differentiation of primordial germ cells (PGCs) in the gonads of embryos and the establishment of culture lines for gonad tissues and PGCs are discussed below. 1. A study of the dynamics of glycogen lock structure during cleavage and blastoderm cell transformation by ABC method In the early stage of cleavage, the cytoplasm of the whole cleavage sphere was positive for GSII, and the cytoplasm of the middle layer was specific for BPA. This is the first time I've seen a woman. The blastoderm leaf cells in the blastoderm leaf stage after egg laying are positive and negative. The results show that there are some differences in the characteristics of the cytoplasmic components in the early embryo, such as the existence of similar cytoplasmic components, the dynamic characteristics of the cytoplasmic components, and the characteristics of the cytoplasmic components. 2. Culture line of gonad tissue was established, undifferentiated gonads were incubated for 6 days, 10% fetal serum (FCS),1% fetal serum (FCS),119 culture sites were cultured for 2 ~ 13 days. Male gonads differentiate sexually from normal embryos, female gonads differentiate sexually from sex cords, albumen and cortex, germ cells differentiate sexually from sperm, and egg structures differentiate sexually from female gonads. The differentiation of male gonads, FCS, and the development of male gonads Under the above culture conditions, male gonads are capable of self-regulation, and sexual differentiation of female gonads is developed. The factors affecting sexual differentiation of female gonads and FCS (Erickson,1974) should be considered. 3. The culture system of primordial germ cells was established by the first lecture of anatomy, Kumamoto University School of Medicine. The culture system of primordial germ cells was established during the initial embryo blood flow and migration period after incubation for 2 days. The production of antibodies against isolated cell populations was tested.