ヒトIL-2レセプターβ鎖の粘膜附属リンパ装置における発現とその免疫病理学的意義

人IL-2受体β链在粘膜副淋巴管中的表达及其免疫病理学意义

基本信息

批准号：
03670151
负责人：
後藤邦彦
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至 1992
项目状态：
已结题

项目摘要

増殖因子が腫瘍細胞を分裂増殖させるシグナル伝達に主要な役割を演じているが、そのメカニズムを解明することが現在もっとも重要な急務の一つになっている。最近、われわれはヒトT細胞の培養細胞系を用いて、インターロイキン2(IL-2)とIL-2レセプターα鎖・β鎖とが結合して小胞が形成され、細胞内に入ること及び、IL-2添加後30分には核近傍にIL-2レセプターβ鎖(IL-2Rβ)が発現すること等を免疫電顕法を用いて明らかにした。これらIL-2Rβの基礎実験に加えて、ヒト小腸の粘膜附属リンパ装置のリンパ球にIL-2Rβの発現を観察した。現在、粘膜附属リンパ装置(MALT)という概念が出され免疫系細胞と上皮細胞との直接的な関係が証明され、悪性リンパ腫の発生・増殖にも深い関係があることが示唆されている。実験方法はヒトT細胞系(IL-2に依存して増殖するILT-Mat、IL-2に依存せずに増殖するMT-2等)及び摘出したヒト消化管を用い。培養細胞系は、10%胎児牛血清添加RPMI培地(10RPMI)にて2時間37℃CO_2ふ卵器でpreincubationし、PBSにて2回洗滌後IL-2、100単位/mlを4℃で30分間incubationした。PBSにて洗浄後3%BSA添加PBSにて所定時間37℃incubationする。所定時間後periodate-cysine-paraformaldehyde(PLP)にて浮遊細胞の状態のまゝ加え、1時間固定し次にこの固定液のまゝmicrowaveをかけ(37℃を越えないようにする)、4℃に戻して後固定した(総計4時間)。ヒト消化管(Peyer 板を含むMALT)は摘出したものを適当な大きさに切り出して培養細胞と同様に固定した。ヒト消化管のMALTにおいてはIL-2Rαは8例中1例に発現を見たがIL-2Rβはその1例においても検出できなかった。T細胞培養系においては30℃で突然に突起が形成される現象を見い出したが増殖には関係しなかった。

生长因子在划分和扩散肿瘤细胞的信号传导中起着主要作用，阐明这些因素的机制目前是最重要和最紧迫的需求之一。最近，我们使用免疫电子显微镜使用培养的人T细胞系证明了介体2（IL-2）和IL-2受体α-和β链的势必会形成囊泡，进入细胞，并在30分钟后在核30分钟后表达IL-2受体β-链（IL-2Rβ）。除了这些IL-2Rβ的这些基本实验外，在人类小肠的粘膜附着的淋巴机构的淋巴细胞中也观察到IL-2Rβ的表达。目前，已经引入了粘膜附着的淋巴机（MALT）的概念，并且已经证明了免疫系统细胞与上皮细胞之间的直接关系，这表明与恶性淋巴瘤的发展和增殖存在密切的关系。所使用的实验方法是人类T细胞系（ILT-MAT，根据IL-2，MT-2生长，它根据IL-2生长）并切除了人类胃肠道。将培养的细胞系预孵育在RPMI培养基（10RPMI）中，在37°C中补充了10％的胎牛血清2小时CO_2 OVA机器，用PBS洗涤两次，然后在4°C的100单位/ml IL-2孵育30分钟。用PBS洗涤后，在37°C下在3％BSA的PBS中孵育。指定的时间后，将细胞添加到周期 - 蛋白甲醛（PLP）的浮动细胞中，固定1小时，然后将微波炉应用于固定溶液（以防止其超过37°C），返回到4°C，然后固定到4°C，然后固定（总4小时）。提取人类胃肠道（含麦芽板的麦芽板），然后切成适当的尺寸，并以与培养细胞相同的方式固定。在人类胃肠道麦芽中，在8例中有1例表达IL-2Rα，但在一种情况下无法检测到IL-2Rβ。在T细胞培养系统中，我们发现了一种现象，其中突发突然在30°C下形成，但与增殖无关。