抗原の相補的発現に基づく癌の診断と治療:癌のHeterogeneityの克服

基于抗原互补表达的癌症诊断和治疗：克服癌症异质性

• 批准号: 04152013
• 负责人: 大内 憲明
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152013/
• 关键词: 乳癌; モノクローナル抗体; アドリアマイシン; ターゲティング療法; シスアコンチル酸; ZR-75-1

1.ヒト乳癌培養細胞株、手術標本にてAM-3抗体、抗c-erbB2抗体(SV4-25)による免疫染色を行い、認識抗原が相補的に発現している例が確認された。非進行癌症例の標本ではどちらか一方のみを発現する細胞からなるものが多かったが、進行癌症例では両方の発現が認められる傾向があった。2.AM-3,SV4-25とadriamycをpH sensitive linker (cis-aconityl acid)にて結合させ、結合体の活性を調べた。adriamycin-抗体結合体は非修飾抗体と比較してaffinityの軽度の低下を認めたがspecificityは保たれていた。どちらも癌細胞へのinternalizationが認められた。3.adriamycin-AM3結合体は抗原陽性細胞ZR-75-1に細胞障害性に示したが抗原陰性細胞SW1116には細胞障害性をしめさず選択的細胞障害性が確認された。adriamycin-AM3結合体の細胞障害性はadriamycinに比べ約70%低下していた。ZR-75-1に対してadriamycin-AM3結合体、adriamycin-SV4-25結合体を同時に作用させた場合細胞障害性はadriamycin量に依存し相乗的効果は認められなかった。4.adriamycin-AM3結合体と反応させたZR-75-1をSCIDマウスに移植し細胞増殖抑制効果を調べた。adriamycin-AM3結合体処理後のZR-75-1はSCIDマウスへの移、植後対照群に比べ有意な増殖抑制が認められた。5.今後の展開;1)AM-3またはAM-3(Feb')2の生体内分布を検討する。2)adriamycin-抗体結合体作用時の細胞内adriamycin量の測定。3)AM-3抗体、抗c-erbB2抗体(SV4-25)variable regionのcDNAをcloningしいわゆるsingle-chain Fv fragmentを作製しその活性を調べ、画像診断への応用を検討する。

1. Immunostaining of AM-3 antibody and anti-c-erbB2 antibody (SV4 -25) in cultured breast cancer cell lines and surgical specimens was performed to identify the presence of complementary antigens. In the case of non-advanced cancer, there is a tendency to develop multiple cell lines and multiple cell lines. 2. AM-3,SV4-25 and adriamyc are pH sensitive linkers (cis-aconityl acid) that regulate the binding and activity of the conjugate. adriamycin-antibody conjugate is a non-modified antibody. The cancer cells in the brain are transformed into tumors. 3. The adriamycin-AM3 conjugate showed cell toxicity to antigen-positive cells ZR-75-1 and antigen-negative cells SW1116. adriamycin-AM3 conjugate is about 70% less cytotoxic than adriamycin. ZR-75-1 and adriamycin-AM3 conjugate, adriamycin-SV4 -25 conjugate act simultaneously, and cell toxicity depends on adriamycin-content. 4. ADRIAMIN-AM3 CONJUGATE: ZR-75-1: ADRIAMIN-AM3 CONJUGATE: ADRIAMIN-AM3 CONJUGATE ZR-75-1 treated with adriamycin-AM3 conjugate was more resistant to SCID than to intentional proliferation. 5. In the future, the distribution of AM-3 and AM-3(Feb') 2 in vivo was investigated. 2) Determination of intracellular adriamycin content when adriamycin-antibody conjugate was used. 3)AM-3 antibody, anti-c-erbB2 antibody (SV4 -25)variable region cDNA cloning, single-chain Fv fragment production, activity modulation, imaging diagnosis and application.