乾燥ストレス下でのサボテンギクのNADP-リンゴ酸酵素の発現調節に関する研究

干旱胁迫下仙人掌菊NADP-苹果酸酶表达调控研究

• 批准号: 05856003
• 负责人: 斎藤 和幸
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05856003/
• 关键词: 乾燥ストレス; CAM; サボテンギク; リンゴ酸酵素

サボテンギクは、乾燥砂漠地帯に生育する耐乾性に優れた植物である。その耐乾性メカニズムの一つとして乾燥ストレスによって光合成型がC_3型からCAM型へシフトすることがあげられる。本研究ではCAM型光合成における鍵酸素の一つであるNADP-リンゴ酸酵素(NADP-ME)に着目し、乾燥ストレス下での発現調節を明らかにする目的で行った。材料および方法: サボテンギクは水耕栽培し、水耕液のNaCl濃度を400mMに高めることによってCAM型光合成を発現させた。抗NADP-ME抗体は、CAM型サボテンギクの葉身より精製したNADP-MEを使って作製した。結果及び考察: 1.C_3型及びCAM型サボテンギクの葉身及び根よりNADP-MEを抽出し、デイビス法に従って電気泳動後、イムノブロットアナリシスを行ったところ、C_3型葉身のNADP-MEはCAM型の葉身及び根のものとは移動度が異なっていた。2.C_3型及びCAM型の葉身のNADP-MEのペプチドマップは類似し、二つのNADP-MEの一次構造は類似していることが分かった。3.抗NADP-ME抗体を使った免疫沈降反応及びELISAによってC_3型とCAM型のNADP-MEでは抗原性が異なることが示された。4.NADP-MEのcDNA断片をプローブとしたノーザンブロットアナリシス及びドットブロットアナリシスによって乾燥ストレスによるNADP-MEのmRNAの増加が認められた。以上の結果から、サボテンギクのNADP-MEはC_3型とCAM型のものが存在し、乾燥ストレスによってC_3型のNADP-MEは消失し、CAM型のNADP-MEが発現されることが明らかとなった。更に、乾燥ストレスによるNADP-MEの発現はmRNAのレベルで調節されていることが分かった。

A dry, sandy land. The drying resistance of C_3-type and CAM-type photosynthetics was studied. This study aimed to clarify the regulation of CAM-type photosynthesis by NADP-enzyme (NADP-ME) in the production of CAM-type photoreceptors. Material and method: Hydroponic culture, hydroponic solution NaCl concentration of 400mM, high concentration of CAM-type photosynthesis Anti-NADP-ME antibodies were purified and produced in the presence of CAM. The results and investigation are as follows: 1. The degree of mobility of the leaf body and root of the C_3 and CAM type leaf bodies is different after the extraction of NADP-ME and the electromigration of NADP-ME. 2. The NAPD-ME of C_3-type and CAM-type leaf bodies are similar, and the primary structure of NAPD-ME is similar. 3. Anti-NADP-ME antibodies are used to immunize and immunize C_3 and CAM-type NADP-ME. 4. An increase in the mRNA of NADP-ME was recognized when the cDNA fragments of NADP-ME were exposed to dry skin using natural and natural skin patches. The results show that the NAD P-ME of C_3 type and CAM type exist, the NAD P-ME of C_3 type disappears, and the NAD P-ME of CAM type appears. The expression of NADP-ME mRNA was regulated by the expression of NADP-ME mRNA.

项目成果

斎藤和幸: "塩ストレス下でのMesembryanthemum crystallinum L.のNADP-リンゴ酸酵素の発現調節" 日本作物学会紀事. 62. 85-86 (1993)

Kazuyuki Saito：“盐胁迫下 NADP-苹果酸酶在 Mesembryanthemum crystallinum L. 中表达的调节”日本作物科学学会杂志 62. 85-86 (1993)。