RNA腫瘍ウイルスの増殖をトランスに抑制するエンベロ-プ蛋白質変異体の解析

抑制RNA肿瘤病毒反式增殖的包膜蛋白突变体分析

• 批准号: 05152023
• 负责人: 岩本 愛吉
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05152023/
• 关键词: murine leukemia virus; dominant negative mutaut; envelope gene

我々の教室で樹立されたフレンドウイルス変異株の1つは6960番目の塩基に点変異を持つため、Env蛋白質361番目のアミノ酸がシステインからアルギニンへと変異している。この変異Env蛋白質(FCr)は分子内および分子間S-S結合により多量体を形成し、粗面小胞体(ER)に蓄積する。DNAトランスフェクションによりモロニ-白血病ウイルス(Mo-MLV)が慢性感染したNIH3T 3細胞にFCrを導入すると、Mo-MLV Env蛋白質とFCrがヘテロ複合体を形成し、Mo-MLVのEnv蛋白質の大部分もERにトラップされる。その結果、培養上清中に産生されるMo-MLVの感染価が約百分の一に下がる。Mo-MLV Env蛋白質とFCrのヘテロ複合体形成はFCr-LCK融合タンパク質を用いたepitope taggingによっても証明できた。一方、FCrを発現させたNIH3T3細胞に後からMo-MLVを感染しようとしても、ほとんど感染させることができない。感染初期の複製中間体DNAの形成が認められないことから感染の初期過程の阻害であり、FCrがエコトロピックMLVレセプタ-とER内で結合し、レセプタ-をERに捕捉するためと考えられる。以上のようにFCrは1個の変異でウイルス増殖過程の2箇所を抑制する、我々の知る限り最初の、ドミナント・ネガティブ変異体である。FCrの作用はエコトロピックMLV特異的で、レトロウイルスベクタ-に組み込んだFCrとアンフォトロピックMLVパッケ-ジング細胞を用いてFCrを遺伝子に持つレトロウイルス粒子を作った。感染により培養細胞にFCrを強制発現させ、対照細胞集団に比べてMo-MLVに対する抵抗性を獲得させることができるようになった。

We have established a system for the production of protein, protein, and protein. We have established a system for the production of protein, protein, and protein. These heterogenous proteins (FCr) are formed by intramolecular and intermolecular S-S binding and accumulate in rough vesicles (ER). DNA sequence analysis showed that most of the FCr protein and FCr protein complexes were formed in NIH 3T3 cells infected with chronic leukemia (Mo-MLV), and most of the ER protein of Mo-MLV was detected. As a result, the production of Mo-MLV in culture supernatant was about 1 percent lower than that in control group. Mo-MLV Env protein and FCr complex formation FCr-LCK fusion protein tagging A side, FCr, was found in NIH 3T3 cells, followed by Mo-MLV infection. The formation of replicative intermediate DNA in the early stage of infection is recognized as a barrier to the early stage of infection. The above FCr has 1 variation, 2 inhibition, 1 restriction, 1 restriction, 1 restriction, 2 restriction, 1 restriction, 1 restriction, 2 restriction, 3 restriction, 4 restriction, 5 restriction, 6 restriction, 7 restriction, 6 restriction, 7 restriction, 7 restriction, 6 restriction, restriction, 7 restriction, restriction The role of FCr in MLV specific cells, FCr gene transfer, FLV particle transfer FCr stress in infected cells and resistance to Mo-MLV infection

项目成果

Matano,T.et al.: "trans-Dominant interference with virus infection at two different stages by a mutant envelope protein of Friend murine leukemia virus" Journal of Virology. 67. 2026-2033 (1993)

Matano,T.等人：“Friend 鼠白血病病毒的突变包膜蛋白在两个不同阶段对病毒感染的反式显性干扰”病毒学杂志。