レトロウィルスで癌化した細胞におけるエピジェネティックな変化

逆转录病毒转化细胞的表观遗传变化

• 批准号: 02152023
• 负责人: 岩本 愛吉
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02152023/
• 关键词: ラウス肉腫ウィルス; DNAメチル化

ラット線維芽細胞3Ylをラウス肉腫ウィルス(RSV)でトランスホ-ムしたH21細胞からは、比較的容易にリバ-タントが分離でき,そこからまた再トランスホ-マントが分離できる。ノ-ザンブロットでRSVの転写物を調べると,リバ-タントでは全て検出レベル以下にシャットオフされている。トランスホ-マントでは,RSVで本来予測されるmRNA(38S,28S,21S)以外に18S,15Sの異常に小さいRSV由来の転写物が認められる。この異常なサイズのmRNAの起源とH21におけるRSVの転写調節機構を明らかにするためにクロ-ン化したプロウィルスを調べたところ,H21には1本の完全なゲノムと欠損型のゲノムが存在し、異常なサイズのmRNAは欠損型に由来する。即ち、調べた限りのH21の亜株では,染色体上の別の場所に存在する2つのRSV分子の転写のON,OFFが同期している。欠損型ウィルスは,src遺伝子の極く一部のみを持つだけなので細胞のトランスホ-メ-ションは完全型のプロウィルスからのsrc遺伝子発現による。クロ-ン化した種々の断片を用いてトランスホ-マント,リバ-タントのDNAのメチル化をサザンブロットで比較したところ,プロウィルスより上流の細胞のDNAや,pol,env,srcといったウィルス中央部ではほとんど差が認められないが5'及び3'LTR周辺のメチル化の程度がリバ-タントで高い。MspIで切断し,LTRをプロ-ブとして用いたサザンブロットで,約1.2kbのバンドがリバ-タントに特異的であったが、これは完全型プロウィルスの5'LTRU5内部のMspI切断部位のメチル化によることが分った。一方、RSVプロウィルスを約10コピ-持つXC細胞からも、形態的に異なる細胞が分離でき、それらの間でRSVの転写量が異なる。この場合も、転写量の多い株で,LTRのメチル化が低くなっていた。

3Yl

项目成果

Yoshikawa,H.et al.: "Detection and typing of multiple genital human papillomaviruses by DNA amplification with consensus primers." Jpn.J.Cancer Res.(1991)

Yoshikawa, H.et al.：“通过使用共有引物进行 DNA 扩增来检测和分型多种生殖器人乳头瘤病毒。”

Yoshikawa,H.et al.: "Amplification and typing of multiple cervical cancerーassociated human papillomavirus DNAs using a single pair of primers." Int.J.Cancer. 45. 990-992 (1990)

Yoshikawa, H. 等人：“使用一对引物对多种宫颈癌相关的人乳头瘤病毒 DNA 进行扩增和分型。”Int.J.Cancer 45. 990-992 (1990)

Kawabata,M.et al.: "Clonal variation of adenylyl cyclase activity in a rat tumor cell line caused by change in G proteinーcatalytic unit interaction." J.Cell.Physiol.144. 448-456 (1990)

Kawabata, M. 等人：“G 蛋白-催化单元相互作用的变化导致大鼠肿瘤细胞系中腺苷酸环化酶活性的克隆变异。”J.Cell.Physiol.144 (1990)。

Takuwa,N.: "Role of Ca^<2+> influx in bombesinーinduced mitogenesis in Swiss 3T3 fibroblasts." J.Biol.Chem.266. 1403-1409 (1991)

Takuwa，N.：“Ca^2+ 流入在瑞士 3T3 成纤维细胞中铃蟾肽诱导的有丝分裂发生中的作用。”J.Biol.Chem.266（1991）。

Horio,K.: "Epigenetic control of tumor cell morphology" Jpn.J.Cancer Res.(1991)

Horio,K.：“肿瘤细胞形态的表观遗传控制”Jpn.J.Cancer Res.(1991)