イネ核ゲムに存在する葉緑体リボソームタンパク質遺伝子の解析

水稻核宝石中叶绿体核糖体蛋白基因的分析

• 批准号: 05760006
• 负责人: 堤 伸浩
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05760006/
• 关键词: イネ; 葉緑体; リボソームタンパク質遺伝子

本研究では、葉緑体機能を改変し育種的に利用するための基礎的な知見を得るために、核にコードされている葉緑体のリボソームタンパク質サブユニットの遺伝子をクローン化し、転写調節領域・トランジット配列・RNAのプロセッシングを明らかにすることを目的としている。イネ葉緑体のリボソームタンパク質L12の遺伝子は、進化の過程で葉緑体ゲノムから核ゲノムへ移行したと考えられている。当初の計画では、タバコのrpl12遺伝子のcDNAクローンを利用して、イネのrpl12遺伝子をクローン化する予定であった。しかし、rpl12をプローブとしてイネのDNAに対しサザンハイブリダイゼーションを試みたが、タバコ由来のプローブにハイブリダイズするシグナルは得られなかった。また、イネの幼植物体からmRNAを抽出し、ノーザンハイブリダイゼーションをおこなった結果からも、イネの転写産物は検出できなかった。これは、タバコの配列とイネの配列の間のホモロジーが低いためであると考えられた。新たにライムギでrpl12遺伝子の塩基配列が報告されたので、ライムギとタバコの間でrpl12の塩基配列のホモロジーを調べた。その結果、rpl12の塩基配列はタバコとライムギの間で大きく異なっていることがわかった。これは、葉緑体に存在するリボソームタンパク質遺伝子の塩基配列の保存性が高いことと対照的である。スクリーニングに用いるプローブを得るために、rpl12の塩基配列で、ライムギとタバコで保存性の高い180bpをもとに、イネのmRNAをテンプレートとしてRTPCRでイネの配列を増幅した。その結果、目的の長さの断片が増幅され、この断片をクローン化して塩基配列を決定しrpl12遺伝子の一部であることを確認した。現在、イネのcDNAライブラリーの作成が終了し、rpl12の遺伝子のスクリーニングをおこなっている。また、ミトコンドリアから核へ移行した配列の解析も平行しておこなった。イネのミトコンドリアに存在するプラスミド様DNAは、核のゲノム内に相同配列が存在する。これらの相同配列は、葉緑体のリボソームタンパク質遺伝子と同様に、オルガネラから、核へ移行したのではないかと考えられた。これらの核に存在する相同配列をRFLPマッピングしたところ、第8染色体と第1染色体の特定領域に集中して存在することが明らかとなった。

This study で は, chloroplast function を change - し breeding に using す る た め の based な knowledge を have る た め に, nuclear に コ ー ド さ れ て い る chloroplast の リ ボ ソ ー ム タ ン パ ク qualitative サ ブ ユ ニ ッ ト の heritage 伝 son を ク ロ ー ン し, planning, regulating field · ト ラ ン ジ ッ ト assortment, RNA の プ ロ セ ッ シ ン グ を Ming ら か に す る こ と を purpose Youdaoplaceholder0 て て る る. イ ネ chloroplast の リ ボ ソ ー ム タ ン パ ク qualitative L12 の heritage の 伝 は, evolution process で chloroplasts ゲ ノ ム か ら nuclear ゲ ノ ム へ transitional し た と exam え ら れ て い る. Original の project で は, タ バ コ の rpl12 heritage 伝 son の cDNA ク ロ ー ン を using し て, イ ネ の rpl12 heritage 伝 son を ク ロ ー ン change す る designated で あ っ た. し か し, rpl12 を プ ロ ー ブ と し て イ ネ の DNA に し seaborne サ ザ ン ハ イ ブ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン を try み た が, タ バ コ origin の プ ロ ー ブ に ハ イ ブ リ ダ イ ズ す る シ グ ナ ル は have ら れ な か っ た. ま た, イ ネ の young plants か ら mRNA を spare し, ノ ー ザ ン ハ イ ブ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン を お こ な っ た results か ら も, イ ネ の product planning write は 検 out で き な か っ た. <s:1> れ タバコ, タバコ <s:1> configuration と ネ, <s:1> configuration <s:1> between <s:1> ホモロジ が が が lower ためであると ためであると examination えられた. New た に ラ イ ム ギ で rpl12 posthumous son 伝 の salt base with column が report さ れ た の で, ラ イ ム ギ と タ バ コ の between で rpl12 の salt base with column の ホ モ ロ ジ ー を adjustable べ た. そ の results, rpl12 の salt base with column は タ バ コ と ラ イ ム ギ の で between big き く different な っ て い る こ と が わ か っ た. こ れ は, chloroplast に す る リ ボ ソ ー ム タ ン パ ク qualitative heritage 伝 son の salt base with high column の preservation sex が い こ と と of seaborne で あ る. ス ク リ ー ニ ン グ に with い る プ ロ ー ブ を have る た め に, rpl12 の salt base with で, ラ イ ム ギ と タ バ コ で save sex の high い 180 bp を も と に, イ ネ の mRNA を テ ン プ レ ー ト と し て RTPCR で イ ネ の match column を rights of し た. そ の results, long purpose の さ の fragment が rights of さ れ, こ の fragment を ク ロ ー ン change し て salt base with column を decided し rpl12 heritage 伝 son の a で あ る こ と を confirm し た. Now, イ ネ の cDNA ラ イ ブ ラ リ ー の made が し, the end of rpl12 の posthumous son 伝 の ス ク リ ー ニ ン グ を お こ な っ て い る. Youdaoplaceholder0, また トコ ドリア ドリア ら kernel へ transposition た た alignment <s:1> analytic <s:1> parallel てお てお てお なった なった イ ネ の ミ ト コ ン ド リ ア に exist す る プ ラ ス ミ ド others は, nuclear DNA の ゲ ノ ム に within the same match column が exist す る. こ れ ら の same column は, chloroplast の リ ボ ソ ー ム タ ン パ ク qualitative heritage 伝 son と with others に, オ ル ガ ネ ラ か ら, nuclear へ transitional し た の で は な い か と exam え ら れ た. こ れ ら の nucleus に す る with same column を RFLP マ ッ ピ ン グ し た と こ ろ と chromosomes 1, 8 chromosomes の に specific areas concentrated し て exist す る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

A.Kanazawa: "Restriction fragments homologous to mitochondrial plasmid like DNAs are located within limited chromosomal regious on the rice nuclear geuowe." Thear. Appl. Genet.87. 577-586 (1993)

A.Kanazawa：“与线粒体质粒 DNA 同源的限制性片段位于水稻核基因组的有限染色体区域内。”