RAPD法によるユリ属の原種および交配種の識別

RAPD法鉴定百合属原种和杂交种

• 批准号: 05760036
• 负责人: 山岸 真澄
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Ishikawa Agricultural College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05760036/
• 关键词: 雑種判定; 種間交雑雑種; ユリ属; DNAフィンガープリント; DNAマーカー; Lilium; PCR; RAPD

ユリ属の種・種間交雑雑種・品種の遺伝的な解析に、Randomly Amplified Polymorphic DNA(RAPD)法を応用した。一般にRAPD法の場合、PCRのアニーリング温度は低いが、ユリ属でRAPD法を行う場合は、比較的高い、54℃がアニーリング温度として適当である事がわかった。10から18baseのランダムプライマーを76種類試したところ、18種類のプライマー(24%)が有効であった。これらのプライマーを用いて増幅されたDNAフィンガープリントの様相を示し、各々の種・雑種・品種の間で多型を検出し、これらを効率よく識別することができた。ユリ属のRAPD法は種や雑種や品種の鑑定に有用であると考えられた。PCRによって増幅された一部のDNA断片は、ユリ属の節(亜属)に特異的で、同じ節に属する種や、これらの種に由来する雑種に共通して増幅された。このような、節特異的なRAPDマーカーは6つ特定され、このうち1つはSinomartagon節に3つはLeucolirion b節に、1つはLeucolirion a節に、1つはArchelirion節に、それぞれ特異的であった。近年節間交雑雑種がいくつか作出されているが、7つの節間交雑雑種にRAPD法を用いたところ、各節間交雑雑種の二つの交配親がそれぞれ属する二つの節に特異的なマーカーが増幅された。この事は、節特異的なRAPDマーカーは、節間交雑雑種の雑種判定に有効であることを示している。

将随机扩增的多态性DNA（RAPD）方法应用于百合属的物种，种间种间杂交和品种的遗传分析。在RAPD方法的情况下，PCR的退火温度通常很低，但是当在百合属中进行RAPD方法时，已经发现相对较高的退火温度为54°C是合适的。在尝试了76个从10到18个碱基的随机引物后，有18个引物（24％）有效。显示了使用这些引物扩增的DNA指纹，并在每个物种，杂化和多样性之间检测到多态性，并且能够有效地鉴定出它们。莉莉属的RAPD方法被认为可用于鉴定物种，杂种和品种。通过PCR扩增的一些DNA片段特异于百合属（亚属），并通过属于这些物种的相同节点和杂种的物种通常扩增。确定了六个此类节点特异性的RAPD标记，其中一个特定于Sinomartagon条款，三个针对Leucolirion b子句，一个条款为leucoliririon a条款，一个条款为Archeliririon子句。近年来，已经生产了几种节点杂种，当Rapd用于七个节点混合动力车时，每个节点杂种的两个节点都属于两个节点。这表明节点特异性的RAPD标记有效地确定了节间交叉的杂交。